HIV-1 BaL腹腔途径感染人源化NS γ-chainnull小鼠模型

来源文献：Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models.

PMID:31868180

DOI:10.3791/60315

For the acute and reactivation models, inject 6–8 week-old NS γ-chainnull mice intraperitoneally with human PBMCs derived from a healthy donor or HIV-infected patient who was under ART,respectively. In both models, include mice injected with PBMCs from a healthy donor without HIV infection (sham) as controls.Mice were clean the mice with a pre-wetted alcohol pad in the lower left/right quadrant of the abdomen. Inject 15,000 TCID50 of the HIV BaL virus contained in 200 µL of sterile RPMI 1640.Administer oral ART at least 3 weeks after infection, when high viral load is observed, in the chronic, acute, and reactivation models. Calculate the doses of tenofovir disoproxil fumarate (TDF), emtricitabine (FTC), and raltegravir (RAL), according to Km values of 37 and 3 for humans and mice, respectively26. Typically, the human-equivalent doses of TDF, FTC, and RAL are 61.7 mg/kg/day, 40.7 mg/kg/day, and 164 mg/kg/day, respectively.

1、1. SIVmac251静脉感染恒河猴外周血病毒载量结果

8只SIVmac251静脉感染恒河猴均在感染后7d检出病毒载量阳性，之后迅速上升，在感染后14d达到高峰，峰值在107至108copies/mL之间，随后迅速下降（图1）。SIVmac251静脉感染后42d到140d感染猴的血浆载量比较稳定，1、2、3、4、9、11六只感染猴血浆病毒载量维持在105至107copies/mL之间；10号猴血浆病毒载量下降至105copies/mL以下；12号猴血浆病毒载量一直维持在较高水平，即107copies/mL以上。

图1 SIVmac251静脉感染中国恒河猴外周血病毒载量结果

Fig.1 Theviremia (viral RNA copies/ml plasma) in Chinese-original rhesus macaquesinfected intravenously with SIVmac251

1、 2. SIVmac251静脉感染恒河猴CD4+/CD8+比值结果

8只感染猴CD4+/CD8+的比例在SIVmac251静脉感染后持续下降，均于感染后14d出现倒置。2、4、10、11、12猴在感染后期一直维持在1以下的水平，其中，2、10、11三只猴维持在0.5上下波动。1、3、9三只感染猴在SIVmac251静脉感染后期CD4+/CD8+比值有些许反弹，在1.0上下波动。（图2）。

图2 SIVmac251静脉感染中国恒河猴外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞比值

Fig.2 The changes of CD4+/CD8+ ratio of T lymphocytes in Chinese-original rhesus macaquesinfected intravenously with SIVmac251

3.SIVmac251静脉感染恒河猴CD4+ T细胞绝对数

8只感染猴CD4+细胞绝对数在SIVmac251静脉感染后迅速下降，随后发生回弹，在感染后56d下降至最低，之后维持在稳定水平（图3）。12号猴的CD4+细胞绝对数在感染后231天下降至50个/µL，出现艾滋病症状，继而死亡。4号猴的CD4+细胞绝对数在感染后259天下降至100个/µL以下；3号猴的CD4+细胞绝对数一直在800-1000个/µL上下浮动。

图3 SIVmac251静脉感染中国恒河猴外周血CD4+T淋巴细胞绝对数

Fig.3 The CD4+T cell counts (per l blood) in Chinese-origin rhesus macaques infectedintravenously with SIVmac251

所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。

1.该模型制备比较成熟，国内外都有此模型，构建和评价指标一致，所以该模型应用广泛，具有统一的操作规程。

2. 该模型制备的关键：1）小鼠必须是重度免疫缺陷的，而且饲养环境必须洁净；2）HIV操作需要生物安全。

3.此模型具有完善的人的免疫系统，HIV感染后，具有艾滋病病人相似的临床症状，所以具有很高的比较医学应用价值。