人胰腺癌细胞SW1990荧光素酶标记裸鼠模型

胰腺癌（pancreatic cancer）临床表现取决于癌的部位、病程早晚、有无转移以及邻近器官累及的情况。其临床特点是整个病程短、病情发展快和迅速恶化。最多见的是上腹部饱胀不适、疼痛。虽然有自觉痛，但并不是所有病人都有压痛，如果有压痛则和自觉痛的部位是一致的。其它表现有黄疸、食欲不振消化道症状、消瘦乏力、腹部包块、腹水、症状性糖尿病、血栓性静脉炎等及其它。

胰腺癌的病因尚不十分清楚。其发生与吸烟、饮酒、高脂肪和高蛋白饮食、过量饮用咖啡、环境污染及遗传因素有关；近年来的调查报告发现糖尿病人群中胰腺癌的发病率明显高于普通人群；也有人注意到慢性胰腺炎病人与胰腺癌的发病存在一定关系，发现慢性胰腺炎病人发生胰腺癌的比例明显增高。

人胰腺癌细胞株SW1990来自ATCC，为高转移人胰腺癌细胞株，于1978年取自一名58岁胰尾癌并脾转移的男性患者，CEA 阳性，1979年患者死于肝转移。SW1990 由美国学者Kyriazis等建株。具有侵袭力强、转移效率高和转移范围大的特点。

裸鼠无胸腺裸鼠（Nude Mouse，简称裸鼠），先天性胸腺缺陷的突变小鼠，是由于第Ⅶ连锁群（Linkage group）内裸体位点的等位基因发生纯合而形成的突变小鼠新品种。裸鼠（纯合子nu/nu突变鼠）主要表现为无毛（但可看到一种细毛组织学证明有被毛滤泡）以及缺乏正常胸腺。

1.表达载体构建：构建chicken β-actin-luc-NEO载体。CAG启动子由巨细胞病毒（thecytomegalovirus，CMV)早期增强子（earlyenhancer element）和鸡β-肌动蛋白（ chickenbeta-actin ）启动子组成，用于驱动基因在哺乳动物载体的高水平表达。

2. SW1990-LUC荧光细胞系的获得：采用脂质体2000转染SW1990细胞，转染后24 h，用含有G418的培养液筛选细胞三周，获得稳定表达luciferase的细胞株，选择其中高表达的克隆株扩大培养。

3. 肿瘤细胞的植入及活体荧光成像：收集处于生长对数期的转染细胞，稀释至5×106／mL。取BALB／CA- nu裸鼠麻醉，0.1mL/只接种于胰腺被膜。分别在接种的第7、14、21和28天四个时间点观察肿瘤的生长及转移情况情况。观察前每只小鼠腹腔注射荧光素底物(1.5mg/10g)，饱和三溴乙醇(0.18 mL/10 g)麻醉后放入活体荧光影像系统摄像，SlideBook 4.0软件进行分析。

本模型将luc基因转染到SW1990中得到了高表达luciferase细胞株。将luc标记的SW1990细胞经原位接种至BALB／CA-nu裸鼠，生物化学发光结合活体荧光成像系统实现无创、实时、动态的检测在体肿瘤的生长情况。原位接种第7天即可观察到肿瘤发光，随着时间增加，原位肿瘤荧光强度增强和面积增大（图1）。

模型优点：人胰腺癌皮下移植瘤模型，虽能维持来源肿瘤的组织结构和生化特征，但由于皮下移植瘤易形成纤维性假胞膜，肿瘤呈局限性、膨胀式生长，很少发生远处脏器的转移，不符合胰腺癌的生物学特性。相比之下，人胰腺癌原位移植瘤模型不仅维持了原有肿瘤组织的结构，它还更还地模拟人胰腺癌在体内的血供和生长环境，它在宿主内能以类似于患者体内的方式显示其恶性行为包括了原发肿瘤的生长、局部的浸润和随后远处脏器的转移整个过程。

应用：胰腺癌是源发于胰腺的恶性肿瘤，文献报道已建立胰腺癌细胞系有SW1990 、Capan-2和Patu8988等约20余株 ，其发病率和死亡率比大概是1：0．99。手术切除是胰腺癌能够达到根治的唯一选择，但胰腺癌早期缺少特异性症状，发现比较晚。同时胰腺癌对放疗、化疗不敏感，因此建立适宜的人胰腺癌动物模型，可以为深入研究胰腺癌的发生发展、侵袭转移机制以及寻找新的治疗策略提供有效的手段。

该小动物模型饲养在清洁级动物中，微生物处于监控状态，动物房有相应的保护措施，小鼠不会出现逃逸，不会对外界环境造成影响。