重组蛋白动态结合能力测试

信息概要

重组蛋白动态结合能力测试是一种用于评估重组蛋白与其他分子（如配体、抗体或受体）相互作用的技术。该测试通过实时监测结合动力学参数，为药物开发、生物治疗和诊断试剂的研发提供关键数据。检测的重要性在于其能够揭示蛋白结合的亲和力、特异性和稳定性，确保重组蛋白在临床应用或工业生产中的可靠性和有效性。

此类检测通常涵盖结合速率、解离速率、平衡常数等核心参数，并可应用于多种重组蛋白类型，如抗体、酶、细胞因子等。第三方检测机构通过标准化流程和先进设备，为客户提供准确、可重复的检测服务，助力科研与产业化进程。

检测项目

• 结合速率常数（ka）
• 解离速率常数（kd）
• 平衡解离常数（KD）
• 最大结合容量（Bmax）
• 特异性结合比例
• 非特异性结合水平
• 温度依赖性结合分析
• pH依赖性结合分析
• 离子强度影响评估
• 结合位点饱和度
• 竞争性结合分析
• 多价结合效应
• 结合动力学模型拟合
• 结合半衰期（t1/2）
• 结合自由能变化（ΔG）
• 结合焓变（ΔH）
• 结合熵变（ΔS）
• 结合协同性分析
• 时间依赖性结合曲线
• 浓度梯度响应测试

检测范围

• 单克隆抗体
• 多克隆抗体
• Fab片段
• scFv片段
• 融合蛋白
• 细胞因子
• 趋化因子
• 生长因子
• 酶类重组蛋白
• 受体蛋白
• 配体蛋白
• 抗原蛋白
• 疫苗候选蛋白
• 信号肽
• 结构域蛋白
• 膜蛋白
• 核蛋白
• 分泌型蛋白
• 糖基化修饰蛋白
• 磷酸化修饰蛋白

检测方法

• 表面等离子共振（SPR）：实时监测分子间相互作用的光学技术
• 生物膜干涉技术（BLI）：通过光干涉测量结合动力学
• 等温滴定量热法（ITC）：直接测定结合热力学参数
• 荧光偏振（FP）：基于荧光标记分析结合事件
• 微量热泳动（MST）：通过温度梯度检测结合引起的分子特性变化
• 动态光散射（DLS）：分析结合导致的粒径分布变化
• 核磁共振（NMR）：解析分子相互作用的原子级结构信息
• 酶联免疫吸附试验（ELISA）：定量检测特异性结合
• 荧光共振能量转移（FRET）：基于荧光探针的能量转移分析
• 圆二色谱（CD）：监测结合引起的二级结构变化
• 分析超速离心（AUC）：通过沉降速度研究复合物形成
• 石英晶体微天平（QCM）：利用频率变化检测表面结合质量
• 流式细胞术（FCM）：高通量分析细胞表面蛋白结合
• 蛋白质芯片技术：并行检测多种蛋白相互作用
• 交联质谱（XL-MS）：鉴定结合界面氨基酸残基

检测仪器

• Biacore系列SPR仪
• Octet系列BLI系统
• MicroCal ITC200
• NanoTemper Monolith
• Malvern Zetasizer
• Bruker NMR spectrometer
• SpectraMax微孔板读板机
• FluoroMax荧光分光光度计
• Jasco圆二色谱仪
• Beckman Optima AUC
• Q-Sense石英晶体微天平
• BD FACSCelesta流式细胞仪
• RayBio蛋白质芯片系统
• Thermo Orbitrap质谱仪
• Agilent HPLC系统