重组蛋白荧光偏振测试

信息概要

重组蛋白荧光偏振测试是一种基于荧光偏振技术的高灵敏度检测方法，广泛应用于蛋白质相互作用、药物筛选、免疫分析等领域。该技术通过测量荧光标记分子在偏振光激发下的旋转速度，间接反映分子大小、构象变化或结合状态。

检测的重要性在于：能够实时监测分子间动态相互作用，具有高通量、低样本消耗的优势，为药物研发、生物标志物发现和疾病机制研究提供关键数据支持。第三方检测机构通过标准化流程确保结果的可重复性和准确性，满足科研与工业需求。

检测项目

• 荧光偏振值测定
• 结合亲和力分析
• 解离常数（Kd）计算
• 竞争性结合实验
• 蛋白-配体相互作用检测
• 分子旋转弛豫时间
• 荧光标记效率评估
• 特异性结合率测定
• 非特异性结合背景校正
• 温度依赖性分析
• pH稳定性测试
• 离子强度影响评估
• 蛋白浓度线性范围验证
• 荧光探针稳定性检测
• 动态结合过程监测
• 多组分相互作用分析
• 荧光偏振信号信噪比
• 缓冲液兼容性测试
• 抑制剂效价测定
• 激动剂活性评估

检测范围

• G蛋白偶联受体（GPCR）
• 激酶类重组蛋白
• 抗体-抗原复合物
• 核受体家族蛋白
• 细胞因子与受体
• 酶-底物相互作用体系
• DNA结合蛋白
• 信号转导适配蛋白
• 病毒外壳蛋白
• 膜通道蛋白
• 分子伴侣蛋白
• 免疫检查点蛋白
• 生长因子类蛋白
• 凝血系统蛋白
• 细胞粘附分子
• 肿瘤标志物蛋白
• 神经递质受体
• 自噬相关蛋白
• 表观遗传修饰蛋白
• 细菌毒素蛋白

检测方法

• 稳态荧光偏振法：测量平衡状态下的偏振信号
• 时间分辨荧光偏振：区分短寿命和长寿命荧光组分
• 竞争结合实验：通过标记/未标记配体竞争计算Ki值
• 滴定分析法：逐步增加配体浓度测定结合曲线
• 温度梯度扫描：评估温度对分子结合的影响
• 微孔板高通量筛选：96/384孔板并行检测
• 双偏振检测：同时监测两个偏振方向的信号
• 荧光寿命-偏振联用：结合时间域和偏振信息分析
• 表面等离子体共振联用：实时监测结合与构象变化
• 微量滴定法：适用于珍贵样本的低体积检测
• 动态光散射校正：消除聚集体的偏振干扰
• 内滤效应校正：消除高浓度样本的光吸收影响
• FRET-偏振联用：结合能量转移与偏振分析
• Z因子评估：验证高通量检测体系可靠性
• 交叉验证ELISA：与免疫检测方法结果比对

检测仪器

• 荧光偏振分析仪
• 多功能酶标仪
• 时间分辨荧光检测系统
• 微量分光光度计
• 动态光散射仪
• 恒温振荡培养箱
• 自动化液体处理项目合作单位
• 超微量蛋白定量仪
• 高速冷冻离心机
• 生物分子相互作用分析仪
• 荧光寿命光谱仪
• 纳米粒度分析仪
• 多功能流式细胞仪
• 高通量筛选系统
• 全自动洗板机