冷冻电镜检测

信息概要

冷冻电镜检测是一种利用低温电子显微镜技术对生物大分子、细胞器或病毒等样品进行高分辨率三维结构解析的先进检测方法。该技术通过将样品快速冷冻至液氮温度，使其保持在接近天然状态，从而获得更真实的结构信息。

冷冻电镜检测在生命科学、药物研发、疫苗设计等领域具有重要作用。通过该技术，研究人员可以深入了解生物大分子的结构与功能关系，为疾病机制研究和新药开发提供关键依据。同时，冷冻电镜检测也是质量控制的重要环节，确保生物制品的结构完整性和功能性。

检测项目

• 样品纯度分析
• 颗粒大小分布
• 结构分辨率测定
• 三维重构质量评估
• 二级结构解析
• 三级结构解析
• 四级结构解析
• 分子量测定
• 对称性分析
• 表面电荷分布
• 疏水区域定位
• 活性位点识别
• 配体结合位点分析
• 蛋白质聚集状态
• 病毒衣壳完整性
• 膜蛋白拓扑结构
• 核酸-蛋白质相互作用
• 蛋白质-蛋白质相互作用
• 动态构象变化分析
• 低温稳定性评估

检测范围

• 蛋白质复合体
• 病毒颗粒
• 核糖体
• 离子通道
• 膜蛋白
• 酶分子
• 抗体药物
• 疫苗抗原
• 核酸蛋白复合物
• 细胞器
• 分子马达
• 受体蛋白
• 转运蛋白
• 转录因子复合物
• 染色质结构
• 病毒衣壳
• 核小体
• 微管蛋白
• 分子伴侣
• 信号转导复合物

检测方法

• 单颗粒分析：通过采集大量单个颗粒的图像进行三维重构
• 电子断层扫描：对厚样品进行多角度成像和三维重建
• 负染电镜：使用重金属盐染色增强样品对比度
• 低温固定：快速冷冻样品保持其天然状态
• 聚焦离子束铣削：制备薄样品用于高分辨率成像
• 电子衍射：分析周期性结构的对称性和排列
• 能量过滤成像：提高图像信噪比和对比度
• 自动数据采集：软件控制的大规模图像采集
• 颗粒挑选：从原始图像中识别和提取目标颗粒
• 二维分类：对颗粒图像进行初步分类和筛选
• 三维初始模型构建：建立初步的三维结构模型
• 三维分类：区分不同构象或组成的亚群
• 高精度对齐：优化颗粒图像的对齐参数
• 分辨率评估：通过傅里叶壳层相关性评估结构分辨率
• 模型优化：通过迭代优化提高结构模型质量

检测仪器

• 透射电子显微镜
• 场发射电子显微镜
• 冷冻样品制备系统
• 自动上样机器人
• 直接电子探测器
• 能量过滤器
• 低温样品台
• 离子束铣削系统
• 高压冷冻仪
• 冷冻替代系统
• 超薄切片机
• 负染项目合作单位
• 自动数据采集软件
• 三维重构项目合作单位
• 图像处理服务器

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