ATAC-seq开放染色质测试
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信息概要
ATAC-seq(Assay for Transposase-Accessible Chromatin using sequencing)是一种用于检测开放染色质的高通量测序技术。该技术通过转座酶Tn5优先切割开放染色质区域并结合高通量测序,能够快速、地绘制全基因组范围内的染色质可及性图谱。ATAC-seq技术在表观遗传学、基因调控、细胞分化及疾病机制研究中具有重要应用价值。
检测开放染色质状态对于理解基因表达调控、识别转录因子结合位点以及研究疾病相关的表观遗传变异至关重要。通过ATAC-seq技术,研究人员能够获得高分辨率的染色质开放区域信息,为后续的功能基因组学研究提供关键数据支持。
检测项目
- 全基因组染色质可及性分析
- 转录因子结合位点预测
- 差异开放区域(DARs)分析
- 核小体定位分析
- 启动子区域开放状态检测
- 增强子区域开放状态检测
- 染色质状态分类
- 基因调控元件注释
- 细胞类型特异性开放区域鉴定
- 疾病相关变异位点筛选
- 表观遗传修饰关联分析
- 染色质环结构预测
- 单细胞ATAC-seq数据分析
- 多组学数据整合分析
- 进化保守性区域分析
- 样本间一致性评估
- 数据质量控制与过滤
- 峰值注释与功能富集分析
- 可变剪切事件关联分析
- 样本聚类与降维可视化
检测范围
- 人类全基因组染色质可及性
- 小鼠全基因组染色质可及性
- 大鼠全基因组染色质可及性
- 斑马鱼全基因组染色质可及性
- 果蝇全基因组染色质可及性
- 线虫全基因组染色质可及性
- 酵母全基因组染色质可及性
- 植物全基因组染色质可及性
- 原代细胞染色质可及性
- 细胞系染色质可及性
- 肿瘤组织染色质可及性
- 正常组织染色质可及性
- 胚胎发育不同阶段染色质可及性
- 干细胞分化过程染色质可及性
- 免疫细胞染色质可及性
- 神经细胞染色质可及性
- 心血管系统染色质可及性
- 消化系统染色质可及性
- 呼吸系统染色质可及性
- 内分泌系统染色质可及性
检测方法
- 转座酶Tn5切割法:利用Tn5转座酶特异性切割开放染色质区域
- 文库构建:通过PCR扩增构建测序文库
- 高通量测序:使用Illumina平台进行双端测序
- 数据质量控制:FastQC进行原始数据质量评估
- 序列比对:Bowtie2或BWA将reads比对到参考基因组
- 峰值检测:MACS2或HOMER识别显著开放区域
- 差异分析:DESeq2或edgeR检测样本间差异开放区域
- 功能注释:ChIPseeker对开放区域进行基因注释
- 富集分析:GREAT或DAVID进行功能通路富集
- 转录因子预测:HOMER或MEME进行转录因子结合位点预测
- 核小体定位:NucleoATAC分析核小体占据情况
- 单细胞数据分析:Cell Ranger或ArchR处理单细胞ATAC-seq数据
- 多组学整合:Seurat或MOFA整合ATAC-seq与RNA-seq数据
- 可视化:IGV或UCSC基因组浏览器展示结果
- 统计分析:R或Python进行定制化分析
检测仪器
- Illumina NovaSeq 6000
- Illumina HiSeq X Ten
- Illumina NextSeq 550
- Illumina MiSeq
- Agilent 2100 Bioanalyzer
- Qubit Fluorometer
- Thermo Fisher Nanodrop
- Covaris S220
- Bio-Rad CFX96
- Beckman Coulter Biomek FXP
- Thermo Fisher KingFisher
- Eppendorf Centrifuge 5424
- Thermo Fisher Sorvall Legend Micro 21
- Thermo Fisher Pico 17
- Bioruptor Pico
了解中析