蛋白质样品Edman降解法测序实验

信息概要

Edman降解法是一种经典的蛋白质N端测序技术，通过逐步切除并鉴定氨基酸残基，实现对蛋白质序列的准确测定。该方法广泛应用于生物制药、疾病研究、蛋白质工程等领域，对于验证重组蛋白结构、检测翻译后修饰以及发现新型生物标志物具有重要意义。第三方检测机构提供的Edman降解法测序服务，可确保数据准确性、重复性和合规性，为科研与工业客户提供关键的质量控制支持。

检测项目

• N端氨基酸序列测定
• 蛋白质纯度分析
• 样品中游离氨基酸检测
• N端封闭修饰鉴定
• 序列覆盖率评估
• 重复单元一致性验证
• 二硫键定位分析
• 非天然氨基酸掺入检测
• 降解产物鉴定
• N端乙酰化修饰检测
• 信号肽切割位点确认
• 突变位点验证
• 多肽片段拼接验证
• 蛋白质异构体区分
• N端糖基化修饰筛查
• 样品氧化状态评估
• 序列数据库比对验证
• 批次间序列一致性分析
• 酶切位点确认
• 重组蛋白序列正确性验证

检测范围

• 重组治疗性蛋白
• 单克隆抗体
• 疫苗抗原
• 细胞因子
• 酶制剂
• 多肽类药物
• 融合蛋白
• 血液制品
• 诊断用蛋白
• 基因工程疫苗
• 生物类似药
• 蛋白质复合物
• 膜蛋白提取物
• 病毒外壳蛋白
• 植物源性蛋白
• 动物组织提取蛋白
• 发酵产物
• 合成多肽
• 糖蛋白
• 磷酸化蛋白

检测方法

• Edman化学降解法：基于苯异硫氰酸酯的逐步降解反应
• HPLC分离：采用反相色谱分离PTH-氨基酸衍生物
• 紫外检测法：通过275nm波长检测PTH-氨基酸
• 质谱验证法：LC-MS辅助鉴定特殊修饰氨基酸
• 荧光标记法：增强低丰度样品的检测灵敏度
• 毛细管电泳法：高分辨率分离降解产物
• N端封闭分析：盐酸水解结合质谱鉴定
• 二硫键还原法：DTT/碘乙酰胺处理后的序列分析
• 酶切辅助测序：限制性酶切后分段测序
• 微量化技术：纳升级样品处理流程
• 自动化序列拼接：多片段数据整合算法
• 定量氨基酸分析：校正序列收率计算
• 变性凝胶辅助法：电泳分离后转膜测序
• 固相支持法：PVDF膜固定样品技术
• 平行降解技术：多通道同时测序

检测仪器

• 蛋白质测序仪
• 液相色谱仪
• 紫外可见分光光度计
• 质谱仪
• 毛细管电泳系统
• 氨基酸分析仪
• 真空离心浓缩仪
• 电泳转印装置
• 微量分光光度计
• 自动馏分收集器
• 氮吹仪
• PH计
• 恒温混合仪
• 超纯水系统
• 生物安全柜