电泳纯度分析测试（SDS-PAGE）

信息概要

电泳纯度分析测试（SDS-PAGE）是一种基于十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳的生化分析技术，主要用于分离和评估蛋白质样品的纯度、分子量及相对丰度。该测试通过将蛋白质样品在电场作用下迁移通过凝胶基质，根据分子大小实现分离，随后通过染色或成像技术进行可视化分析。检测的重要性在于确保生物制品（如抗体、疫苗或重组蛋白）的质量控制、纯度验证和批次一致性，这对于药物开发、生物技术研究和临床诊断至关重要，有助于避免杂质干扰、提高产品安全性和有效性。

检测项目

• 蛋白质纯度百分比
• 分子量测定
• 条带清晰度评估
• 杂质条带检测
• 非还原条件下的分离分析
• 还原条件下的分离分析
• 条带强度定量
• 蛋白质降解评估
• 二聚体或多聚体检测
• 样品均一性分析
• 背景染色水平
• 凝胶均匀性检查
• 迁移率校准
• 蛋白质浓度相关性
• 条带拖尾现象分析
• 标准品比对验证
• 样品加载量优化
• 电泳时间影响评估
• 温度控制效果
• 缓冲液pH值影响
• 凝胶浓度适应性
• 染色方法比较
• 脱色效率测试
• 成像系统校准
• 数据重复性验证
• 灵敏度极限测定
• 特异性条带识别
• 样品预处理效果
• 电泳电压稳定性
• 凝胶保存条件评估

检测范围

• 单克隆抗体
• 多克隆抗体
• 重组蛋白
• 酶制剂
• 疫苗蛋白
• 血浆蛋白
• 细胞裂解物
• 组织提取物
• 肽段样品
• 病毒蛋白
• 细菌蛋白
• 植物蛋白
• 动物蛋白
• 融合蛋白
• 糖蛋白
• 脂蛋白
• 磷酸化蛋白
• 膜蛋白
• 核蛋白
• 细胞因子
• 激素蛋白
• 抗原蛋白
• 抗体片段
• 蛋白质复合物
• 诊断试剂蛋白
• 食品蛋白
• 环境样品蛋白
• forensic蛋白样品
• 工业酶产品
• 生物制药中间体

检测方法

• SDS-PAGE电泳法，基于蛋白质在凝胶中的迁移率分离
• 考马斯亮蓝染色法，用于蛋白质条带可视化
• 银染法，提高检测灵敏度
• Western blotting法，结合抗体进行特异性检测
• 图像分析软件法，定量条带强度
• 标准曲线法，用于分子量校准
• 还原剂处理法，如使用β-巯基乙醇断裂二硫键
• 非还原电泳法，保留蛋白质天然结构
• 梯度凝胶法，优化不同分子量范围的分离
• 等电聚焦结合SDS-PAGE法，用于二维分析
• 荧光染色法，如SYPRO Ruby染色
• 质谱联用法，验证蛋白质身份
• densitometry法，测量条带光密度
• 样品变性处理法，确保均匀迁移
• 缓冲系统优化法，调整pH和离子强度
• 温度控制电泳法，减少热效应
• 快速电泳法，缩短分析时间
• 微型凝胶法，用于小样品量分析
• 自动化电泳系统法，提高重现性
• 预处理离心法，去除不溶物

检测仪器

• 电泳槽
• 电源供应器
• 凝胶成像系统
• 紫外可见分光光度计
• 微量离心机
• 摇床
• pH计
• 天平
• 微波炉
• 移液器
• 凝胶铸造架
• 染色盒
• 脱色摇床
• 扫描仪
• 数据分析软件

电泳纯度分析测试（SDS-PAGE）中，如何确保结果的准确性？通过使用标准品进行校准、优化电泳条件、重复实验验证以及采用高精度成像系统来减少误差。
电泳纯度分析测试适用于哪些类型的样品？主要适用于蛋白质样品，如抗体、酶、重组蛋白等生物分子，但需根据样品特性调整预处理方法。
电泳纯度分析测试的常见问题有哪些？常见问题包括条带模糊、背景过高或迁移异常，通常由样品制备不当、凝胶缺陷或电泳参数错误引起。