P-gp底物测试

信息概要

P-gp底物测试是评估化合物是否为P-糖蛋白（P-glycoprotein）底物的关键检测服务。P-gp是一种重要的药物转运蛋白，主要表达于肠道、血脑屏障和肝脏等组织，影响药物的吸收、分布和排泄。检测P-gp底物特性对于药物研发至关重要，因为它有助于预测药物相互作用、生物利用度和潜在毒性，从而优化给药方案和确保用药安全。

检测项目

• 底物转运活性
• 抑制常数测定
• 表观渗透系数
• 双向转运实验
• 细胞毒性评估
• ATP酶活性
• 膜囊泡转运
• 药物累积实验
• 体外肠吸收模拟
• 血脑屏障穿透性
• 代谢稳定性
• 蛋白结合率
• 荧光底物竞争
• 基因表达分析
• 转运速率计算
• IC50值测定
• 药物相互作用筛查
• 细胞单层通透性
• P-gp表达水平
• 底物特异性
• 转运抑制实验
• 药代动力学参数
• 体外清除率
• 组织分布预测
• 膜流动性评估
• 底物亲和力
• 温度依赖性测试
• pH影响分析
• 时间进程研究
• 代谢产物鉴定

检测范围

• 小分子药物
• 天然产物
• 化学合成物
• 抗癌药物
• 抗生素类
• 心血管药物
• 神经系统药物
• 抗病毒药物
• 激素类药物
• 免疫抑制剂
• 植物提取物
• 生物技术产品
• 新化学实体
• 仿制药
• 中药成分
• 营养补充剂
• 环境污染物
• 食品添加剂
• 化妆品成分
• 农药残留
• 工业化学品
• 代谢中间体
• 蛋白质药物
• 肽类化合物
• 核酸类药物
• 放射性标记物
• 荧光探针
• 纳米材料
• 基因治疗载体
• 细胞治疗产品

检测方法

• Caco-2细胞模型法：使用人结肠癌细胞模拟肠道吸收
• MDCK-MDR1细胞转运法：利用转染P-gp的犬肾细胞评估底物特性
• 膜囊泡摄取实验：分离细胞膜囊泡测量ATP依赖性转运
• ATP酶活性测定：检测P-gp水解ATP的活性变化
• 双向通透性实验：比较顶端到底端和底端到顶端的药物转运
• 荧光底物竞争法：使用已知荧光底物进行竞争性抑制研究
• LC-MS/MS分析：通过液相色谱-质谱联用定量药物浓度
• 细胞毒性MTT法：评估化合物对细胞活力的影响
• 体外肠吸收模拟：使用人工膜或组织模型预测吸收
• 血脑屏障模型法：基于内皮细胞培养评估穿透性
• 基因沉默技术：通过RNA干扰研究P-gp功能
• 蛋白印迹法：检测P-gp表达水平
• 流式细胞术：分析细胞表面P-gp的表达
• 放射标记转运法：使用放射性同位素追踪药物移动
• 药代动力学建模：整合体外数据预测体内行为
• 高通量筛选：自动化平台快速测试多个化合物
• 等温滴定量热法：测量底物与P-gp的结合热力学
• 表面等离子共振：实时监测分子相互作用
• 细胞成像技术：可视化药物在细胞内的分布
• 代谢组学分析：全面评估代谢产物对转运的影响

检测仪器

• 液相色谱仪
• 质谱仪
• 荧光显微镜
• 酶标仪
• 流式细胞仪
• 细胞培养箱
• 超速离心机
• 蛋白质印迹系统
• 实时PCR仪
• 紫外可见分光光度计
• 液相色谱-质谱联用仪
• 细胞通透性测定系统
• ATP检测仪
• 表面等离子共振仪
• 等温滴定量热仪

P-gp底物测试中，如何判断一个化合物是否为P-gp底物？通常通过双向转运实验观察药物从顶端到底端和反向的转运比率，如果比值显著高于阈值，则可能为底物。P-gp底物测试对药物研发有何重要性？它有助于预测药物在体内的吸收和分布，减少临床失败风险，优化剂量设计。哪些因素会影响P-gp底物测试结果？因素包括细胞模型的选择、实验条件如pH和温度、以及化合物的溶解性和稳定性。