肠胀气大鼠H-1细小病毒感染模型

一、疾病概述

胃肠胀气是一种人类常见的症状，其诱发原因多样。消化道传播的病毒可导致病毒性肠炎，会导致造成胃肠蠕动功能下降，容易产生胃肠胀气，而且肠道内微环境变化可导致菌群失调，进而出现胀气等症状。

二、模型背景

1、H1细小病毒信息

大鼠H1细小病毒（H1 parvovirus ，H1PV)是大鼠的自身感染的病原体，大鼠感染后多无明显临床表现，但可存在肠道炎症反应。

2、实验动物背景信息

各品系大鼠对H1PV感染后多无症状。文献报道和我们自己的研究表明，Wistar近交品系的大鼠在新生期可出现典型的感染症状，成年动物感染后可出现消化道炎症。

3、研究背景

大鼠H1PV是一类大鼠的高流行病原，成年动物多不致病，但对幼龄大鼠有影响，干扰其发育，实验感染可致死。同属的KRV株病毒报道可至成年动物出现胀气症状。

参考文献：

Liang CT, Shih A, Chang YH et al. Microbial contaminations oflaboratory mice and rats in Taiwan from 2004 to 2007. J Am Assoc Lab Anim2009;48:381–6

Mahler M, Kohl W. A serological survey to evaluate contemporaryprevalence of viral agents and Mycoplasma pulmonis in laboratory mice and ratsin western Europe. Lab Anim 2009; 38: 161–5

Taylor K, Copley CG. Diagnosis of Kilham rat virus using PCR. LabAnim 1994;28:26–30.

实验材料

实验动物为SPF级Wistar大鼠，感染症状等与性别无明显关系，感染优选5周龄雄性大鼠。

实验使用毒株为ATCC来源H-1毒株（VR-356）。

实验环境

ABSL－２实验室，

使用负压IVC饲养动物。

使用AII型生物安全柜更换动物垫料，并进行感染等操作。

实验操作规程：

病毒扩增：在BSL-2实验室进行病毒扩增，并使用TCID50法测定病毒滴度。

使用100 TCID50／只动物进行灌胃感染。

监测动物临床表征变化。

动物处理伦理：

动物感染实验，动物的痛苦不可避免，应按照伦理审查确定研究的科学性，并根据研究需要减少动物的使用。

1、 鉴定、病原学检查信息

使用PCR方法进行组织病毒评价。病毒在肠道的病毒扩增呈现一过性。此模型的感染后长期的炎症损伤与免疫应答相关。

测试需和组织内参基因表达做均一化处理，如使用GAPDH做内参。

2、 表型分析

感染动物感染后明显临床表现。

3、 病理表型

大体病理可见感染动物出现肠道胀气。

组织病理可见回肠绒毛水肿，充血，炎细胞浸润。

回肠粘膜绒毛上皮细胞坏死，固有层血管扩张充血，炎细胞浸润。

H1PV为低于人间传染病名录三级安全风险的病原，人类感染风险低。

H1PV是大鼠必须排除的病原体，对动物有致病性。会干扰其他实验研究。

鉴于此，此感染实验必须在BSL-2级以上的生物安全实验室进行病原学实验，在ABSL-2实验室进行动物实验。

肠道病毒感染可出现多种症状，其中有肠道胀气等炎症后表征。本模型首次报道了大鼠H1PV感染后的肠道炎症损伤，以及胀气等临床症状，并将其与肠道菌群的改变做关联分析。本模型是研究肠道病毒感染及损伤机制研究的模型。