酶促反应速率检测

信息概要

• 酶促反应速率检测是通过测量酶催化特定底物转化为产物的速度来评估酶活性或动力学特性的核心技术。
• 该检测对生物医药研发（如药物代谢酶分析）、疾病诊断标志物筛查、食品工业工艺优化及环境微生物活性评估具有决定性意义。
• 精准的速率数据可揭示酶抑制剂/激活剂效应，为酶工程改造和生物催化剂设计提供关键参数支撑。

检测项目

• 初始反应速率测定
• 米氏常数（Km）分析
• 最大反应速率（Vmax）计算
• 催化常数（Kcat）测定
• 酶特异性识别能力
• pH活性曲线表征
• 温度稳定性曲线
• 抑制剂半数抑制浓度（IC50）
• 激活剂效应评估
• 底物饱和动力学
• 产物抑制常数测定
• 酶-底物复合物解离常数
• 变构效应调控分析
• 时间进程曲线拟合
• 线性反应区间判定
• 酶活性单位（U/mg）标定
• 辅因子依赖性检测
• 金属离子激活效应
• 不可逆抑制剂结合速率
• 底物类似物竞争性分析
• 多底物协同反应机制
• 酶半衰期（t1/2）测定
• 热失活动力学参数
• 变性剂耐受阈值
• 氧化还原敏感性
• 荧光底物转化效率
• 同位素标记底物追踪
• 酶促反应活化能计算
• 底物抑制常数（Ki）
• 产物反馈抑制强度

检测范围

• 氧化还原酶类
• 转移酶类
• 水解酶类
• 裂合酶类
• 异构酶类
• 连接酶类
• 激酶
• 磷酸酶
• 蛋白酶
• 脂肪酶
• 淀粉酶
• 核酸酶
• 聚合酶
• 限制性内切酶
• 脱氢酶
• 过氧化物酶
• 细胞色素P450
• 葡萄糖氧化酶
• 乳酸脱氢酶
• 脲酶
• 溶菌酶
• 超氧化物歧化酶
• ATP酶
• 胰蛋白酶
• 胃蛋白酶
• 纤维素酶
• 漆酶
• 脂肪氧合酶
• β-半乳糖苷酶
• 辣根过氧化物酶

检测方法

• 分光光度法：通过吸光度变化实时监测产物生成
• 荧光光谱法：利用荧光标记底物检测酶解过程
• 化学发光法：测定发光信号强度反映酶活性
• 电化学法：记录电流/电压变化追踪电子转移
• 微量热法：检测反应体系热量释放动态
• 同位素标记法：追踪放射性标记底物转化率
• 停流技术：毫秒级快速反应动力学分析
• 表面等离子共振：实时监测酶-底物结合过程
• 石英晶体微天平：质量变化关联酶催化效率
• 液相色谱：分离定量反应产物
• 毛细管电泳：高分辨率分离酶解产物
• 质谱联用法：准确鉴定酶促反应中间体
• 比浊法：检测不溶性产物生成速率
• pH-stat法：恒定pH下测量质子释放量
• 酶电极法：生物传感器实时输出电信号
• 免疫检测法：抗体捕获特定酶反应产物
• 纳米孔测序：单分子水平酶切过程监测
• 圆二色谱：酶构象变化与活性关联分析
• 原子力显微镜：纳米尺度酶分子运动观测
• 微流控芯片：高通量微反应体系动力学研究

检测仪器

• 紫外可见分光光度计
• 荧光光谱仪
• 化学发光检测仪
• 酶标仪
• 电化学项目合作单位
• 等温滴定微量热仪
• 快速停流装置
• 表面等离子共振仪
• 石英晶体微天平
• 液相色谱仪
• 毛细管电泳仪
• 液相色谱质谱联用仪
• pH自动滴定系统
• 生物传感器分析平台
• 纳米孔单分子检测系统