艾滋病人源化小鼠模型

一、疾病概述

艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS)，是由人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）引起，以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病，是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。HIV是一种能攻击人体免疫系统的病毒。它把人体免疫系统中最重要的CD4T淋巴细胞作为主要攻击目标，大量破坏该细胞，使人体丧失免疫功能。因此，人体易于感染各种疾病，并可发生恶性肿瘤，病死率较高。HIV在人体内的潜伏期平均为8～9年，患艾滋病以前，可以没有任何症状地生活和工作多年。

艾滋病早已成为关注的公共卫生和社会热点问题，艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。

二、模型背景

1、细胞/基因/病原/其他造模因素信息

1. 人造血干细胞，来源脐带血。用CD34纯化试剂盒，纯化得到造血干细胞。

2. 艾滋病病毒：HIV

2、实验动物背景信息

重度免疫缺陷小鼠，NRG，NOD.Cg-Rag1-/-l2rg-/-

3、研究背景

该动物模型的研究目的及意义；该动物模型的国内外研究进展并附参考文献。

免疫系统人源化的小鼠模型，在一定程度上模拟了免疫系统健全的人，可以用于针对免疫系统的各种疾病模型，该模型可以用于细胞发育、感染性疾病、自身免疫病以及肿瘤治疗等，为研究临床疾病提供了良好的研究平台。

人源化小鼠用于HIV的研究最为广泛，也最成熟，可以用于HIV研究的各个领域，包括致病机理、新型治疗手段和疫苗研究等。Chen等在HIV感染的人源化小鼠上，证明了干扰素在HIV致病中的双重作用；Nussenzweig团队利用HIV感染的人源化小鼠，一直致力于研究抗HIV的广谱性中和性抗体，已经取得了非常好的临床结果；HIV感染的人源化小鼠模型也常用于评价各种HIV治疗的药物。

文献：

1. Cheng L, Yu H, Li G, Li F, Ma J, Li J, ChiL, Zhang L, Su L. (2017). "Type I interferons suppress viral replicationbut contribute to T cell depletion and dysfunction during chronic HIV-1infection." JCI Insight 2(12).

2. Cheng L, Ma J, Li J, Li D, Li G, Li F,Zhang Q, Yu H, Yasui F, Ye C, Tsao LC, Hu Z, Su L, Zhang L. (2017)."Blocking type I interferon signaling enhances T cell recovery and reducesHIV-1 reservoirs." J Clin Invest 127(1): 269-279.

3. Horwitz, J. A., et al. (2017)."Non-neutralizing Antibodies Alter the Course of HIV-1 Infection InVivo." Cell.

1. NRG小鼠饲养：NRG小鼠需要饲养在隔离器或者单独的房间IVC中。

2.纯化造血干细胞：用CD34纯化干细胞试剂盒，纯化脐带血中造血干细胞，纯化的细胞当天移植。

3. 将 4-6 周NRG小鼠提前2小时辐照，剂量是 1.5Gy。

4.将纯化的 CD34+造血干细胞尾静脉注入照射后的小鼠体内，每只小鼠注射1×10e5 细胞。

5.12周后，采血检测人细胞的比例：抗小鼠 PE-CD45；抗人 APC CY7-CD45；抗人 APC-CD3。

6. 麻醉小鼠，用HIV病毒，静脉感染。

7.感染4周后，检测HIV病毒的RNA。

1. 造血干细胞纯化：CD34+细胞的纯度，流式染色在90%以上；

2. 模型构建成功：1）检测外周血、脾脏和骨髓的人细胞的比例，一般在hCD45在20-60%；2）组化染色脾脏、淋巴结、骨髓和肝脏，都有人细胞；3）解剖后，在肠系膜位置，有淋巴结。

3. 病毒学检测

1.该模型制备比较成熟，国内外都有此模型，构建和评价指标一致，所以该模型应用广泛，具有统一的操作规程。

2. 该模型制备的关键：1）小鼠必须是重度免疫缺陷的，而且饲养环境必须洁净；2）HIV操作需要生物安全。

3.此模型具有完善的人的免疫系统，HIV感染后，具有艾滋病病人相似的临床症状，所以具有很高的比较医学应用价值。