人食管癌细胞KYSE510绿色荧光标记BALB／cA-nu裸小鼠模型

食管癌是发生在食管上皮组织的恶性肿瘤，占所有恶性肿瘤的2％。全世界每年约有20万人死于食管癌

食管癌系指由食管鳞状上皮或腺上皮的异常增生所形成的恶性病变。其发展一般经过上皮不典型增生、原位癌、浸润癌等阶段。食管鳞状上皮不典型增生是食管癌的重要癌前病变。

BALB/cA-nu小鼠，胸腺缺失，为第11对染色体隐性遗传，T细胞免疫缺陷，B细胞正常，具有较高的NK细胞活力，无接触敏感性，无移植排斥反应。

获得稳定高表达GFP的细胞，在荧光显微镜下呈强荧光，并且荧光均匀分布于整个细胞内。单克隆GFP细胞在无G418筛选压力下，传代数次后仍能稳定高水平表达GFP，细胞形态和未转染细胞无明显区别。

模型制作采用BALB／cA-nu裸小鼠，鼠龄6周，体重16—20 g。BALB／cA-nu裸小鼠在实验室无特定病原体饲养间饲养。收集处于生长对数期的DsRed标记的KYSE150-GFP细胞肿瘤细胞，稀释至5×106cells／mL。取200μL细胞悬液进行皮下接种。

在接种的7、14、21、28天观察肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到肿瘤荧光，通过肿瘤组织发出的荧光的光子数确定肿瘤的大小，随着观察天数的增加，肿瘤的体积和发光强度增加，且具有很好的相关性。

图1.皮下接种KYSE510-GFP肿瘤生长影像分析

该小动物模型饲养在清洁级动物中，微生物处于监控状态，动物房有相应的保护措施，小鼠不会出现逃逸，不会对外界环境造成影响。