重组蛋白RP-HPLC纯度实验

信息概要

重组蛋白RP-HPLC纯度实验是一种、准确的检测方法，广泛应用于生物制药、科研及临床研究领域。该检测服务通过反相液相色谱（RP-HPLC）技术，对重组蛋白的纯度、杂质及结构特性进行定量分析，确保产品质量符合行业标准及法规要求。检测的重要性在于其为重组蛋白的研发、生产及质量控制提供关键数据支持，帮助客户优化工艺、降低风险并提升产品竞争力。

检测项目

• 纯度分析：测定重组蛋白样品中目标蛋白的百分比含量。
• 杂质检测：识别并定量样品中的非目标蛋白杂质。
• 降解产物分析：检测蛋白在储存或处理过程中产生的降解片段。
• 二聚体或多聚体含量：评估蛋白聚集状态。
• 氧化修饰检测：分析蛋白中甲硫氨酸等氨基酸的氧化程度。
• 脱酰胺化分析：检测天冬酰胺或谷氨酰胺的脱酰胺化修饰。
• 糖基化分析：评估重组蛋白的糖基化修饰水平。
• 疏水性分析：通过保留时间反映蛋白疏水性特征。
• 电荷异质性：检测蛋白因电荷差异导致的峰分布。
• N端或C端截断：分析蛋白末端序列的完整性。
• 肽图分析：通过酶解后色谱峰鉴定蛋白序列。
• 内毒素残留：检测样品中可能存在的内毒素污染。
• 宿主细胞蛋白残留：定量宿主细胞表达的其他蛋白杂质。
• DNA残留：评估宿主细胞DNA的残留量。
• 溶剂残留：检测纯化过程中使用的有机溶剂残留。
• 缓冲液成分分析：确认样品中缓冲盐的种类和浓度。
• 稳定性指示分析：评估蛋白在不同条件下的稳定性。
• 等电点测定：间接反映蛋白的电荷特性。
• 分子量确认：通过保留时间与标准品对比验证分子量。
• 批次一致性：比较不同生产批次样品的色谱图谱。
• 强制降解实验：模拟极端条件评估蛋白降解途径。
• 辅因子结合分析：检测蛋白与辅因子的结合状态。
• 翻译后修饰：鉴定磷酸化、乙酰化等修饰位点。
• 游离巯基检测：评估蛋白中游离巯基的含量。
• 二硫键分析：确认二硫键的正确配对及完整性。
• 疏水相互作用：分析蛋白与色谱柱填料的相互作用。
• 动态范围测试：验证方法的线性检测范围。
• 灵敏度测试：确定方法的最低检测限和定量限。
• 回收率实验：评估样品前处理步骤的蛋白回收效率。
• 重复性测试：验证同一操作者或仪器的结果一致性。

检测范围

• 单克隆抗体
• 多克隆抗体
• 融合蛋白
• 细胞因子
• 生长因子
• 酶类重组蛋白
• 激素类蛋白
• 疫苗抗原
• 受体蛋白
• 信号蛋白
• 转录因子
• 结构蛋白
• 膜蛋白
• 分泌蛋白
• 病毒载体蛋白
• 基因编辑工具蛋白
• 诊断用重组蛋白
• 生物标记物蛋白
• 凝血因子
• 免疫调节蛋白
• 细胞粘附蛋白
• 伴侣蛋白
• 毒素蛋白
• 抗菌肽
• 胶原蛋白
• 纤维蛋白
• 脂蛋白
• 核蛋白
• 糖蛋白
• 磷蛋白

检测方法

• 反相液相色谱（RP-HPLC）：基于疏水性差异分离蛋白。
• 尺寸排阻色谱（SEC）：按分子大小分离蛋白及其聚集体。
• 离子交换色谱（IEX）：根据电荷差异分离蛋白变体。
• 疏水相互作用色谱（HIC）：利用盐浓度梯度分离蛋白。
• 亲和色谱：通过特异性结合分离目标蛋白。
• 毛细管电泳（CE）：高分辨率分离带电蛋白分子。
• 质谱联用技术（LC-MS）：鉴定蛋白序列及修饰。
• 圆二色谱（CD）：分析蛋白二级结构。
• 荧光光谱：检测蛋白构象变化或标记物。
• 紫外-可见光谱：定量蛋白浓度及纯度。
• 动态光散射（DLS）：测定蛋白粒径分布。
• 静态光散射（SLS）：分析蛋白绝对分子量。
• 差示扫描量热法（DSC）：评估蛋白热稳定性。
• 等电聚焦电泳（IEF）：测定蛋白等电点。
• SDS-PAGE：通过分子量分离蛋白并检测纯度。
• Western Blot：特异性检测目标蛋白的存在。
• ELISA：定量分析蛋白浓度或活性。
• 肽质量指纹图谱：通过质谱数据鉴定蛋白。
• Edman降解：N端序列分析。
• 氨基酸组成分析：水解后定量各氨基酸比例。
• 糖分析：测定糖基化类型及程度。
• 游离巯基测定：使用Ellman试剂等化学方法。
• 二硫键定位：通过质谱或化学还原法分析。
• 内毒素检测：鲎试剂法测定细菌内毒素。
• 宿主细胞蛋白ELISA：定量残留宿主蛋白。

检测方法

• 液相色谱仪
• 质谱仪
• 紫外检测器
• 荧光检测器
• 电导检测器
• 折射率检测器
• 毛细管电泳仪
• 圆二色谱仪
• 荧光光谱仪
• 紫外-可见分光光度计
• 动态光散射仪
• 静态光散射仪
• 差示扫描量热仪
• 等电聚焦电泳系统
• SDS-PAGE电泳系统