组织蛋白酶B检测
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检测项目
1. 酶活性测定:单位时间内底物水解量(μmol/min/mg)
2. 最适pH值测定:pH 3.0-8.0梯度测试
3. 温度稳定性:25-65℃热失活曲线分析
4. 米氏常数(Km)测定:Lineweaver-Burk双倒数法
5. 最大反应速度(Vmax):荧光底物法测定
6. 抑制剂IC50值:CA-074特异性抑制实验
7. 金属离子影响:Ca²⁺/Zn²⁺浓度0.1-10mM梯度测试
8. 蛋白浓度测定:BCA法(灵敏度0.5-2000μg/mL)
9. 分子量验证:SDS-PAGE(12%分离胶)
10. 二硫键分析:Ellman试剂法(412nm比色)
11. 底物特异性:Z-Arg-Arg-AMC vs Z-Phe-Arg-AMC对比
12. 储存稳定性:-80℃至25℃不同温度下活性保留率
13. 酶原激活效率:重组procathepsin B激活动力学分析
14. 细胞毒性测试:MTT法(Hela细胞系)
15. 免疫印迹验证:鼠抗人Cathepsin B单克隆抗体(1:1000)
检测范围
1. 人血清/血浆样本
2. 肿瘤组织匀浆液
3. 细胞裂解液(HepG2/RAW264.7等)
4. 重组蛋白制品(≥95%纯度)
5. 溶酶体提取物
6. 基因工程菌表达产物
7. 临床穿刺液样本
8. 药物筛选化合物库
9. 酶抑制剂候选分子
10. 诊断试剂盒原料
11. 生物仿制药中间体
12. 食品加工用酶制剂
13. 化妆品原料提取物
14. 环境微生物培养液
15. 医疗器械表面残留物
检测方法
ISO 20776-1:2019 体外药敏试验标准方法
ASTM E2945-14(2021) 酶活性测定通用规程
GB/T 34800-2017 蛋白酶活力测定方法
GB/T 37837-2019 生物制品中残余酶活性测定
ISO 10993-18:2020 医疗器械生物学评价指南
USP<1112> 生物活性测定法验证要求
EP 2.6.14 欧洲药典酶活性测定通则
JJF 1847-2020 酶活性测量仪器校准规范
检测设备
Tecan Infinite M200 Pro酶标仪:波长范围230-1000nm,温控精度±0.2℃
Agilent 1260 HPLC系统:C18色谱柱(4.6×250mm),UV-Vis检测器
Malvern Zetasizer Nano ZS:动态光散射粒径分析(0.3nm-10μm)
Sartorius Cubis II分析天平:称量范围0.1μg-220g,符合GLP规范
Eppendorf Mastercycler X50 PCR仪:温度梯度功能(4-99℃)
Cytation5细胞成像微孔板检测系统:整合荧光显微与微孔板读数功能
Beckman Coulter Optima XPN-100超速离心机:最大转速100,000rpm
SDS-PAGE电泳系统:PowerPac HC高压电源(3000V,400mA)
中析研究所检测,科学公正准确!
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
了解中析
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