磷酸核糖甲酰甘氨脒合酶检测

检测项目

1. 酶活性测定：反应速率0.1-10 μmol/min·mg

2. 比活力计算：单位蛋白催化效率

3. Km值测定：ATP底物范围0.05-2.0 mM

4. Vmax测定：最大反应速率标定

5. 最适pH值测试：pH 6.5-8.5梯度分析

6. 温度稳定性：25-45℃热失活曲线

7. 金属离子依赖性：Mg²⁺/Mn²⁺浓度0-10 mM

8. 抑制剂IC50测定：6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸(0.1-100 μM)

9. 产物抑制分析：甘氨酰胺核苷酸(0-5 mM)

10. 底物特异性：ATP/GTP利用率比较

11. 蛋白纯度检测：SDS-PAGE ≥95%

12. 分子量测定：MALDI-TOF ±500 Da

13. 二硫键分析：Ellman试剂法

14. 热变性温度：DSC法Tm值测定

15. 储存稳定性：-80℃冻存6个月活性保留率

检测范围

1. 重组表达人源FGAM合成酶

2. 大肠杆菌BL21(DE3)表达体系产物

3. 哺乳动物细胞培养上清液

4. 临床组织活检样本匀浆液

5. 基因工程菌发酵液

6. 体外转录翻译系统产物

7. 抗肿瘤药物筛选样本

8. 遗传代谢病筛查样本

9. 酶固定化载体材料

10. 微生物代谢工程改造菌株

11. 细胞裂解液粗提物

12. 亲和层析纯化中间体

13. 冻干酶制剂复溶液

14. 酶抑制剂候选化合物库

15. 代谢通路重构体系反应液

检测方法

ISO 18113-5:2022体外诊断试剂稳定性测试通则

ASTM E2934-13酶促反应动力学标准指南

GB/T 30934-2014生化试剂中酶活力测定通用方法

ISO/IEC 17025:2017检测实验室能力通用要求

GB/T 22278-2008良好实验室规范原则

JP XVII<8.03>酶活性测定法（日本药典）

USP<1058>分析仪器确认（美国药典）

EP 2.5.32酶制剂检查法（欧洲药典）

检测设备

Cary Eclipse荧光分光光度计（Agilent G9800A）：荧光底物实时监测（340 nm激发/460 nm发射）

SDS-PAGE电泳系统（Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra）：蛋白纯度分析（4-20%梯度胶）

液相色谱仪（Waters Alliance e2695）：底物/产物定量（C18柱，流速1 mL/min）

微量热泳动仪（NanoTemper Monolith NT.Automated）：分子互作亲和力测定（LED波长650 nm）

全自动生化分析仪（Hitachi 7180）：高通量酶活筛查（温度控制±0.1℃）

圆二色光谱仪（JASCO J-1500）：二级结构分析（波长190-260 nm）

实时荧光定量PCR仪（ABI QuantStudio5）：mRNA表达量对照（SYBR Green法）

超微量分光光度计（Thermo NanoDrop One）：蛋白浓度测定（A280/A260比值法）

中析研究所检测，科学公正准确！

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

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