Annexin V-APC/7-AAD双染测试

信息概要

• Annexin V-APC/7-AAD双染测试是细胞凋亡检测的金标准方法，通过荧光标记技术区分活细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞。
• 该检测对药物研发、肿瘤治疗评估及免疫学研究至关重要，可量化细胞死亡途径，为疾病机制研究和治疗方案优化提供关键数据。
• 本机构提供符合GLP规范的标准化检测服务，涵盖样本制备、流式细胞分析及报告解读全流程。

检测项目

• 活细胞比例定量
• 早期凋亡细胞比例
• 晚期凋亡细胞比例
• 坏死细胞比例
• 凋亡指数计算
• 细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻程度
• 细胞膜完整性评估
• 荧光强度阈值设定
• 双阳性细胞群分析
• 单阳性细胞群分析
• 双阴性细胞群分析
• 荧光补偿校正
• 背景荧光水平
• 细胞群异质性分析
• 剂量依赖性凋亡响应
• 时间依赖性凋亡进程
• 凋亡细胞亚群分选
• 细胞周期同步性检测
• 药物IC50值测定
• 凋亡诱导剂效能评估
• 抑制剂保护效应验证
• 细胞活性关联分析
• 荧光信号稳定性测试
• 批间重复性验证
• 样本最佳处理时间窗
• 离心参数优化
• 染色缓冲液渗透压校准
• 钙离子浓度依赖性测试
• 荧光淬灭速率监测
• 仪器线性范围验证
• 数据分析模型拟合度
• 凋亡通路特异性验证
• 细胞类型特异性响应
• 温度敏感性测试
• 试剂批次稳定性对比

检测范围

• 肿瘤细胞系
• 原代免疫细胞
• 干细胞培养物
• 外周血单核细胞
• 组织来源细胞悬液
• 贴壁培养细胞
• 悬浮培养细胞
• 转染后细胞群
• 基因编辑细胞
• 药物处理样本
• 辐射暴露样本
• 病毒感染细胞
• 细菌感染细胞
• 衰老细胞模型
• 神经细胞培养物
• 上皮细胞培养物
• 内皮细胞培养物
• 成纤维细胞培养物
• 肿瘤浸润淋巴细胞
• 骨髓造血细胞
• 肝实质细胞
• 肾小管上皮细胞
• 心肌细胞培养物
• 滑膜细胞培养物
• 角质形成细胞
• 胰岛β细胞
• 精原干细胞
• 卵母细胞
• 胚胎干细胞
• 诱导多能干细胞

检测方法

• 流式细胞术：利用激光激发荧光信号进行单细胞水平定量分析
• 荧光补偿校正：消除光谱重叠的技术
• 门控策略：通过前向/侧向散射设定细胞群分析区域
• 荧光阈值设定：区分阳性/阴性群体的临界值确定
• 动态范围测试：验证仪器检测信号线性范围
• 双参数点图分析：Annexin V-APC vs 7-AAD双维数据解析
• 四象限分析法：划分细胞存活状态区域
• 时间进程实验：监测不同时间点凋亡动态变化
• 剂量响应曲线：建立药物浓度与凋亡率关系模型
• 钙离子依赖性验证：通过EDTA处理确认Annexin V特异性结合
• 膜通透性测试：评估7-AAD染色条件优化
• 荧光淬灭实验：测定信号稳定性时间窗
• 同型对照设置：排除非特异性结合的对照实验
• 死细胞排除法：采用DNA染料区分真实凋亡信号
• 低温离心技术：维持细胞膜完整性的样本处理方法
• 缓冲液优化：调整pH值和离子强度增强染色特异性
• 多色面板验证：在复杂染色体系中确认信号特异性
• 仪器标准化：每日进行荧光微球校准
• 数据分析自动化：应用模板化分析流程
• 统计学处理：采用t检验或ANOVA进行组间差异分析

检测仪器

• 流式细胞仪
• 细胞培养箱
• 生物安全柜
• 低速离心机
• 微量移液器
• 涡旋混合器
• 细胞计数器
• 荧光显微镜
• 恒温水浴锅
• 超低温冰箱
• 液氮储存罐
• 电子天平
• pH计
• 渗透压计
• 高压灭菌器