Vwf-eGFP基因定点敲入小鼠模型

Vwf基因编码一种与止血有关的糖蛋白。编码的前原蛋白在组装成大的多聚体复合物后进行蛋白水解。这些复合物在血小板粘附到血管损伤部位和运输各种蛋白质在血液中发挥作用。Vwf基因的突变导致血管性血友病(VWD)，一种遗传性出血性疾病。VWF作为循环凝血因子VIII（FVIII）的载体蛋白也有重要作用，减少了血浆中FVIII的清除；VWF复合物通过与OPG13、OPG14和RANKL的相互作用从而抑制破骨细胞形成；FVIII.VWF复合物被认为可作为一种抗吸收因子存在于正常生理过程及血肿过程中。eGFP是GFP的突变系，该蛋白对野生型GFP（wtGFP）发生了双氨基酸取代，Leu(亮氨酸)取代Phe64(苯丙氨酸)，Thr(苏氨酸)取代Ser65(丝氨酸)；基于等量溶解蛋白的光谱分析，由于Em(消光系数)的增加和色基构型的率，EGFP在488nm处激发后灯荧光强度为wtGFP的35倍、发光效率更高。

采用Cas9进行基因定点敲入。

Vwf基因编码一种与止血有关的糖蛋白。Vwf基因的突变导致血管性血友病(VWD)，一种遗传性出血性疾病。VWF作为循环凝血因子VIII（FVIII）的载体蛋白也有重要作用，减少了血浆中FVIII的清除。

实验中涉及动物的操作程序已经得到中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物使用与管理委员会的批准(ILAS-GC-2012-001)。

动物症状观察：

表现为体重减轻、弓背竖毛，在回输后的一个月后死亡。