HIV RHPA4259阴道，静脉途径联合感染NOD人源化小鼠模型

来源文献：Humanized NOG Mice for Intravaginal HIV Exposure and Treatment of HIV Infection

PMID：32065160

DOI：10.3791/60723

In an animal facility, 4–6 h before the planned transplantation of the stem cells, irradiate 6–7 week-old female NOD.Cg-Prkdc scid Il2rgtm1Sug/ JicTac (NOG) mice with 0.75 Gy with a Cs137 source. Prepare to transplant 75,000 CD34+ cells per 200 µL into each mouse. Mice were exposed with 21,400 IUs of RHPA4259 intravaginally, 5,157 IUs IV with RHPA4259, or 3,000 IUs IV with YU2. Details regarding IV exposure of humanized mice are not included in this protocol. HIV infections were successfully treated with a cART regimen delivered through mouse chow.Feed mice with pellets containing a standard cART regimen containing 4,800 mg/kg raltegravir (RAL), 720 mg/kg tenofovir disoproxil fumarate (TDF), and 520 mg/kg emtricitabine (FTC)21 (Table 8). These doses were determined assuming that a mouse weighs 25 g and eats 4 g of chow per day. This corresponds to a daily dose of 768 mg/kg RAL, 2.88 mg/kg TDF, and 83 mg/kg FTC.

1、1. SIVmac251静脉感染恒河猴外周血病毒载量结果

8只SIVmac251静脉感染恒河猴均在感染后7d检出病毒载量阳性，之后迅速上升，在感染后14d达到高峰，峰值在107至108copies/mL之间，随后迅速下降（图1）。SIVmac251静脉感染后42d到140d感染猴的血浆载量比较稳定，1、2、3、4、9、11六只感染猴血浆病毒载量维持在105至107copies/mL之间；10号猴血浆病毒载量下降至105copies/mL以下；12号猴血浆病毒载量一直维持在较高水平，即107copies/mL以上。

图1 SIVmac251静脉感染中国恒河猴外周血病毒载量结果

Fig.1 Theviremia (viral RNA copies/ml plasma) in Chinese-original rhesus macaquesinfected intravenously with SIVmac251

1、 2. SIVmac251静脉感染恒河猴CD4+/CD8+比值结果

8只感染猴CD4+/CD8+的比例在SIVmac251静脉感染后持续下降，均于感染后14d出现倒置。2、4、10、11、12猴在感染后期一直维持在1以下的水平，其中，2、10、11三只猴维持在0.5上下波动。1、3、9三只感染猴在SIVmac251静脉感染后期CD4+/CD8+比值有些许反弹，在1.0上下波动。（图2）。

图2 SIVmac251静脉感染中国恒河猴外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞比值

Fig.2 The changes of CD4+/CD8+ ratio of T lymphocytes in Chinese-original rhesus macaquesinfected intravenously with SIVmac251

3.SIVmac251静脉感染恒河猴CD4+ T细胞绝对数

8只感染猴CD4+细胞绝对数在SIVmac251静脉感染后迅速下降，随后发生回弹，在感染后56d下降至最低，之后维持在稳定水平（图3）。12号猴的CD4+细胞绝对数在感染后231天下降至50个/µL，出现艾滋病症状，继而死亡。4号猴的CD4+细胞绝对数在感染后259天下降至100个/µL以下；3号猴的CD4+细胞绝对数一直在800-1000个/µL上下浮动。

图3 SIVmac251静脉感染中国恒河猴外周血CD4+T淋巴细胞绝对数

Fig.3 The CD4+T cell counts (per l blood) in Chinese-origin rhesus macaques infectedintravenously with SIVmac251

所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。

1.该模型制备比较成熟，国内外都有此模型，构建和评价指标一致，所以该模型应用广泛，具有统一的操作规程。

2. 该模型制备的关键：1）小鼠必须是重度免疫缺陷的，而且饲养环境必须洁净；2）HIV操作需要生物安全。

3.此模型具有完善的人的免疫系统，HIV感染后，具有艾滋病病人相似的临床症状，所以具有很高的比较医学应用价值。