脊髓灰质炎恒河猴模型

一、疾病名称

脊髓灰质炎是一种急性传染病，传播广泛，病原为脊髓灰质炎病毒。 此病毒常侵犯中枢神经系统，损害脊髓前角运动神经细胞，导致肢体松弛性 麻痹，多见于儿童，故又名小儿麻痹症

二、疾病临床表现及致病机制

是一种急性传染病，传播广泛，病原为脊髓灰质炎病毒。此病毒常侵犯中枢神经系 统，损害脊髓前角运动神经细胞，导致肢体松弛性麻痹，多见于儿童，故又名小儿麻痹症

目前包括我国在内的１４０ 多个国家仍以口服脊髓灰质炎减毒活疫苗作为主要 预防措施，因疫苗可能会在某些情况下恢复神经毒 性而引起脊髓灰质炎病变，对其安全性进行恰当评价是非常重要的工作。

三、模式动物

猕猴在进化上与人类高度同源，种属差异小，在组织结构和生理特征上与人类极为相似，这一突出特点奠定了恒河猴动物在药物生产和评价、功能和进化比较基因组学研究、人类重大疾病模型复制和应用、再生医学等研究领域中不可或缺的优势地位。

使用脑立体定位仪将微量注射器针头插入丘脑，在两侧丘脑分别注入０畅５ ｍＬ脊髓灰质炎疫苗样 品，原倍浓度及１０－１浓度各 １０只。 注射后４８ ｈ内 死亡或出现非特异性麻痹症状者剔除不计，中途死亡及到期处死动物，做中枢神经系统病理组织学 检查。动物在给药 ２１ ｄ 后，进行安乐死并解剖。完整 取出脑组织及脊髓，１０％甲醛溶液充分固定后，进行取材。 取材时首先寻找脑顶叶区注射点，在注射点前后各取一个切面，以确保取材部位包含针迹。取 材部位包括：额叶、顶叶、注射点、颞叶、枕叶、海马、 基底节、丘脑（以上部位左右大脑双侧取材）、中脑、 小脑、脑桥、延髓、颈膨大、腰膨大。

本模型主要表现为脑组织的病理学改变：注射后４８ ｈ内 死亡或出现非特异性麻痹症状者剔除不计，中途死亡及到期处死动物，做中枢神经系统病理组织学 检查。动物在给药2１ｄ 后，进行安乐死并解剖。将脊髓法中的半切面评分法用于脑内法病理改变的评价方法，分别对脑组织、脊髓颈膨大和腰膨大的半 切面病变进行评分，并对这三个部位的平均病变分 值进行计算，根据分值并参考具体情况进行病变程度的判定。评分标准如下： ０分，未见 病变；１分，轻微病变，仅有炎细胞浸润，未见神经元 损害；２ 分，轻度病变，炎细胞浸润伴有少量的神经元损害；３ 分，中度病变，炎细胞浸润伴有广泛的神经元损害；４ 分，重度病变，大量的神经元损害，伴或不伴有炎细胞浸润。

PVM为低于人间传染病名录三级安全风险的病原，人类感染的风险低，但不排除对免疫功能缺陷者的致病性。

PVM是啮齿类实验动物必须排除的病原体，对动物有致病性。会干扰其他实验研究。

鉴于此，此感染实验必须在BSL-2级以上的生物安全实验室进行病原学实验，在ABSL-2实验室进行动物实验。

１. 病毒滴度的变化：接种病毒后，动物肺组织PVM RT-PCR检测可检出病毒，病毒滴度在感染后３天达到高峰，并可维持至７日，随后滴度下降。

２. 感染动物体重较之未感染动物体重下降，动物多出现竖毛，弓背等症状。严重者体重下降，行动出现迟缓，耳及尾可见紫绀，震颤，处于濒死状态。用于药效评价实验时，应控制感染剂量，降低因感染出现的急性死亡（４日内）。６~７日的死亡率可作为药效评价的指标。

３. 病理损伤以充血、出血、肺组织水肿以及炎细胞浸润为标准，应测定肺间隔，以及肺通气水平，进而评估肺呼吸能力。

４. 炎症因子重点关注IL-1β，IL-6，IL-18，MCP-1，IFN-γ等。

进行人类RSV 肺炎感染研究，国内外推荐使用PVM做替代实验。PVM的毒株不同，实验动物的品系不同，动物的临床表型也会存在差异。本模型的表型与国外进行的模型研究表型相似，在急性期的死亡率较低，有较长的临床治疗的窗口，可用于免疫治疗的疗效评价。