紧密连接蛋白渗漏实验

信息概要

紧密连接蛋白渗漏实验是一种用于评估细胞屏障功能完整性的重要检测方法。该实验通过检测紧密连接蛋白的渗漏情况，反映细胞间连接的紧密程度，广泛应用于药物开发、毒性评估及疾病机制研究等领域。检测紧密连接蛋白渗漏对于确保药物安全性、评估环境污染物的生物毒性以及研究肠道、血脑屏障等生理屏障功能具有重要意义。

检测项目

• 紧密连接蛋白ZO-1表达水平
• 紧密连接蛋白Claudin-1渗漏率
• 紧密连接蛋白Occludin完整性
• 跨上皮电阻(TEER)值
• 荧光标记葡聚糖渗透率
• 细胞旁路通透性
• 紧密连接蛋白JAM-A分布
• 紧密连接蛋白ZO-2表达量
• 紧密连接蛋白Claudin-5渗漏情况
• 紧密连接蛋白Tricellulin表达水平
• 紧密连接蛋白Cingulin分布
• 紧密连接蛋白ZO-3完整性
• 紧密连接蛋白Claudin-3渗漏率
• 紧密连接蛋白Claudin-4表达量
• 紧密连接蛋白Claudin-7渗漏情况
• 紧密连接蛋白Claudin-15分布
• 紧密连接蛋白ZO-1磷酸化状态
• 紧密连接蛋白Occludin降解产物
• 紧密连接蛋白JAM-C表达水平
• 紧密连接蛋白ESAM渗漏率

检测范围

• 肠道上皮细胞
• 血脑屏障模型
• 肾小管上皮细胞
• 肺泡上皮细胞
• 角膜上皮细胞
• 血管内皮细胞
• 胎盘屏障模型
• 血睾屏障模型
• 乳腺上皮细胞
• 膀胱上皮细胞
• 皮肤角质形成细胞
• 视网膜色素上皮细胞
• 肝窦内皮细胞
• 口腔黏膜上皮细胞
• 鼻黏膜上皮细胞
• 胃黏膜上皮细胞
• 子宫内膜上皮细胞
• 气管上皮细胞
• 胆管上皮细胞
• 胰腺导管上皮细胞

检测方法

• 免疫荧光染色法：通过荧光标记抗体检测紧密连接蛋白的分布和表达
• Western Blot：定量检测紧密连接蛋白的表达水平
• 跨上皮电阻测量(TEER)：评估细胞单层屏障功能的完整性
• 荧光标记物渗透实验：测定细胞旁路通透性
• 免疫组织化学：定位紧密连接蛋白在组织中的分布
• 酶联免疫吸附试验(ELISA)：定量检测特定紧密连接蛋白
• 实时荧光定量PCR：检测紧密连接蛋白mRNA表达水平
• 共聚焦显微镜观察：三维重建紧密连接蛋白分布
• 电子显微镜：观察紧密连接超微结构
• 蛋白质组学分析：全面筛查紧密连接相关蛋白
• 流式细胞术：检测细胞表面紧密连接蛋白表达
• 表面等离子共振(SPR)：研究紧密连接蛋白相互作用
• 原子力显微镜：评估紧密连接机械性能
• 钙离子螯合实验：评估钙依赖的紧密连接稳定性
• 蛋白质磷酸化检测：分析紧密连接蛋白修饰状态

检测仪器

• 荧光显微镜
• 共聚焦激光扫描显微镜
• Western Blot电泳系统
• 实时荧光定量PCR仪
• 酶标仪
• 跨上皮电阻测量仪
• 流式细胞仪
• 电子显微镜
• 原子力显微镜
• 表面等离子共振仪
• 蛋白质电泳系统
• 凝胶成像系统
• 超速离心机
• 细胞培养箱
• 生物安全柜