TGF-β/Smad信号通路Western Blot检测
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信息概要
TGF-β/Smad信号通路Western Blot检测是一种用于研究细胞信号转导的重要技术,广泛应用于生物医学研究领域。该检测通过Western Blot方法,定量或定性分析TGF-β/Smad信号通路中关键蛋白的表达水平及磷酸化状态,为疾病机制研究、药物开发及临床诊断提供重要依据。
TGF-β/Smad信号通路在细胞增殖、分化、凋亡及免疫调节等生理过程中发挥关键作用,其异常激活或抑制与多种疾病(如肿瘤、纤维化、自身免疫性疾病等)密切相关。因此,准确检测该通路中相关蛋白的表达及活性变化,对于深入理解疾病发生发展机制及开发靶向治疗策略具有重要意义。
检测项目
- TGF-β1
- TGF-β2
- TGF-β3
- Smad1
- Smad2
- Smad3
- Smad4
- Smad5
- Smad7
- p-Smad2
- p-Smad3
- TGF-βRⅠ
- TGF-βRⅡ
- BMPRⅠ
- BMPRⅡ
- ALK1
- ALK5
- Latent TGF-β
- Thrombospondin-1
- Fibronectin
检测范围
- 细胞裂解液
- 组织匀浆
- 血清
- 血浆
- 培养上清
- 肿瘤组织
- 纤维化组织
- 炎症组织
- 免疫细胞
- 干细胞
- 上皮细胞
- 间充质细胞
- 内皮细胞
- 肌肉组织
- 神经组织
- 肝脏组织
- 肾脏组织
- 肺组织
- 心脏组织
- 骨组织
检测方法
- SDS-PAGE电泳:用于分离蛋白质
- 转膜:将蛋白质转移到PVDF或NC膜上
- 封闭:使用脱脂奶粉或BSA减少非特异性结合
- 一抗孵育:特异性识别目标蛋白
- 二抗孵育:结合一抗并携带标记物
- 化学发光检测:通过发光信号显示蛋白条带
- 灰度分析:定量分析蛋白表达水平
- 磷酸化蛋白检测:使用特异性磷酸化抗体
- 蛋白浓度测定:BCA或Bradford法
- 内参检测:如β-actin或GAPDH
- 免疫沉淀:富集低丰度蛋白
- 双向电泳:用于复杂样本分析
- 质谱验证:确认蛋白身份
- 条带密度分析:使用ImageJ等软件
- 多重Western Blot:同时检测多个蛋白
检测仪器
- 电泳仪
- 转膜仪
- 化学发光成像系统
- 凝胶成像系统
- 微量分光光度计
- 离心机
- 振荡器
- 恒温摇床
- 蛋白电泳槽
- 转膜槽
- 微量移液器
- 恒温水浴锅
- 冷冻离心机
- 超纯水系统
- 分析天平
了解中析