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中析检测

TGF-β/Smad信号通路Western Blot检测

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更新时间:2025-06-25  /
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信息概要

TGF-β/Smad信号通路Western Blot检测是一种用于研究细胞信号转导的重要技术,广泛应用于生物医学研究领域。该检测通过Western Blot方法,定量或定性分析TGF-β/Smad信号通路中关键蛋白的表达水平及磷酸化状态,为疾病机制研究、药物开发及临床诊断提供重要依据。

TGF-β/Smad信号通路在细胞增殖、分化、凋亡及免疫调节等生理过程中发挥关键作用,其异常激活或抑制与多种疾病(如肿瘤、纤维化、自身免疫性疾病等)密切相关。因此,准确检测该通路中相关蛋白的表达及活性变化,对于深入理解疾病发生发展机制及开发靶向治疗策略具有重要意义。

检测项目

  • TGF-β1
  • TGF-β2
  • TGF-β3
  • Smad1
  • Smad2
  • Smad3
  • Smad4
  • Smad5
  • Smad7
  • p-Smad2
  • p-Smad3
  • TGF-βRⅠ
  • TGF-βRⅡ
  • BMPRⅠ
  • BMPRⅡ
  • ALK1
  • ALK5
  • Latent TGF-β
  • Thrombospondin-1
  • Fibronectin

检测范围

  • 细胞裂解液
  • 组织匀浆
  • 血清
  • 血浆
  • 培养上清
  • 肿瘤组织
  • 纤维化组织
  • 炎症组织
  • 免疫细胞
  • 干细胞
  • 上皮细胞
  • 间充质细胞
  • 内皮细胞
  • 肌肉组织
  • 神经组织
  • 肝脏组织
  • 肾脏组织
  • 肺组织
  • 心脏组织
  • 骨组织

检测方法

  • SDS-PAGE电泳:用于分离蛋白质
  • 转膜:将蛋白质转移到PVDF或NC膜上
  • 封闭:使用脱脂奶粉或BSA减少非特异性结合
  • 一抗孵育:特异性识别目标蛋白
  • 二抗孵育:结合一抗并携带标记物
  • 化学发光检测:通过发光信号显示蛋白条带
  • 灰度分析:定量分析蛋白表达水平
  • 磷酸化蛋白检测:使用特异性磷酸化抗体
  • 蛋白浓度测定:BCA或Bradford法
  • 内参检测:如β-actin或GAPDH
  • 免疫沉淀:富集低丰度蛋白
  • 双向电泳:用于复杂样本分析
  • 质谱验证:确认蛋白身份
  • 条带密度分析:使用ImageJ等软件
  • 多重Western Blot:同时检测多个蛋白

检测仪器

  • 电泳仪
  • 转膜仪
  • 化学发光成像系统
  • 凝胶成像系统
  • 微量分光光度计
  • 离心机
  • 振荡器
  • 恒温摇床
  • 蛋白电泳槽
  • 转膜槽
  • 微量移液器
  • 恒温水浴锅
  • 冷冻离心机
  • 超纯水系统
  • 分析天平

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