细胞光老化蛋白质组实验

信息概要

• 细胞光老化蛋白质组实验是一种通过高通量分析蛋白质组变化来研究光诱导细胞老化的检测服务，专注于揭示紫外线或可见光照射下蛋白质表达、修饰和功能的动态变化。
• 检测的重要性在于为化妆品、医药和抗衰老产品研发提供科学依据，帮助评估光保护策略的有效性，并深入理解光老化机制以预防皮肤损伤和疾病。
• 该服务概括了从样品制备到数据分析的全流程，包括蛋白质提取、定量、修饰分析和生物信息学解读，确保全面、准确的检测结果。

检测项目

• 总蛋白质含量
• 胶原蛋白表达水平
• 弹性蛋白表达水平
• 蛋白质磷酸化水平
• 蛋白质乙酰化水平
• 蛋白质泛素化水平
• 蛋白质甲基化水平
• 蛋白质糖基化水平
• 蛋白质硝化水平
• 蛋白质羰基化水平
• 蛋白质-SH group含量
• 蛋白质氧化损伤标志物（如碳ylated proteins）
• 超氧化物歧化酶（SOD）活性
• 过氧化氢酶（CAT）活性
• 谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性
• 炎症相关蛋白质（如TNF-α、IL-6）表达
• 细胞凋亡相关蛋白质（如Caspase-3）表达
• 自噬相关蛋白质（如LC3）表达
• DNA修复蛋白质（如PARP）表达
• 细胞周期蛋白质（如Cyclin D1）表达
• MAPK信号通路蛋白质表达
• NF-κB通路蛋白质表达
• 热休克蛋白质（如HSP70）表达
• 细胞外基质蛋白质表达
• 膜蛋白质表达
• 核蛋白质表达
• 线粒体蛋白质表达
• 内质网蛋白质表达
• 高尔基体蛋白质表达
• 溶酶体蛋白质表达
• 细胞骨架蛋白质（如Actin）表达
• 转录因子（如p53）表达
• 翻译后修饰总体水平
• 蛋白质相互作用网络分析

检测范围

• 全细胞裂解液蛋白质
• 膜蛋白 fraction
• 胞质蛋白 fraction
• 核蛋白 fraction
• 线粒体蛋白
• 内质网蛋白
• 高尔基体蛋白
• 溶酶体蛋白
• 细胞外囊泡蛋白质
• 分泌蛋白
• 结构蛋白
• 酶蛋白
• 受体蛋白
• 通道蛋白
• 转运蛋白
• 信号蛋白
• 调控蛋白
• 伴侣蛋白
• 免疫相关蛋白
• 代谢相关蛋白
• 氧化应激相关蛋白
• 凋亡相关蛋白
• 自噬相关蛋白
• 细胞周期相关蛋白
• DNA相关蛋白
• RNA相关蛋白
• 脂质相关蛋白
• 碳水化合物相关蛋白
• 修饰蛋白（如磷酸化蛋白）
• 特定细胞器蛋白

检测方法

• 液相色谱-质谱联用（LC-MS）：用于蛋白质鉴定和定量，提供高分辨率和高灵敏度分析。
• Western blotting：通过抗体检测特定蛋白质的表达和修饰水平。
• 酶联免疫吸附 assay（ELISA）：定量测量特定蛋白质的浓度，适用于炎症标志物等。
• 免疫荧光：可视化蛋白质在细胞中的定位和分布。
• 共聚焦显微镜：进行高分辨率成像，分析蛋白质的空间表达。
• 流式细胞术：快速分析细胞表面或细胞内蛋白质表达。
• 蛋白质芯片：高通量 screening of multiple proteins simultaneously。
• 双向电泳（2-DE）：基于等电点和分子量分离蛋白质，用于差异表达分析。
• 质谱成像：结合空间信息进行蛋白质组分析，揭示组织或细胞中的分布。
• 蛋白质组学数据分析：使用生物信息学工具进行通路分析和功能注释。
• 蛋白质纯化：通过亲和色谱等方法分离特定蛋白质。
• 蛋白质测序：采用Edman降解或质谱技术确定氨基酸序列。
• 蛋白质相互作用分析：如酵母双杂交系统，研究蛋白质-蛋白质交互。
• 蛋白质修饰分析：使用修饰特异性抗体或质谱检测磷酸化、乙酰化等。
• 蛋白质活性测定：通过酶动力学 assay 测量酶活性。
• 细胞培养和处理：建立光老化模型，控制光照条件进行实验。
• 样品制备：包括蛋白质提取、消化和纯化步骤。
• 色谱分离：使用HPLC或UPLC分离肽段，提高质谱分析效率。
• 质谱 fragmentation：应用CID或ETD技术进行肽段鉴定。
• 定量质谱：如SILAC或iTRAQ，用于相对蛋白质定量。
• 绝对定量质谱：基于标准曲线准确测量蛋白质浓度。
• 蛋白质组数据库搜索：利用Mascot或MaxQuant软件进行肽段匹配。

检测仪器

• 质谱仪
• 液相色谱仪
• 离心机
• 电泳仪
• Western blotting system
• ELISA reader
• 荧光显微镜
• 共聚焦显微镜
• 流式细胞仪
• 蛋白质芯片扫描仪
• 紫外-可见分光光度计
• 纳米滴定量仪
• 细胞培养箱
• 超低温冰箱
• 生物分析仪