细胞沉默免疫组化染色实验

信息概要

• 细胞沉默免疫组化染色实验是一种通过基因沉默技术（如RNA干扰）抑制特定基因表达后，利用免疫组化方法检测蛋白质表达变化的检测服务。
• 该检测对于研究基因功能、疾病机制、药物靶点验证和生物标志物发现至关重要，确保高灵敏度、高特异性和可重复性。
• 本服务涵盖样本处理、染色、成像和数据分析，适用于多种细胞和组织类型，为科研和临床提供可靠数据支持。

检测项目

• EGFR表达水平
• HER2表达水平
• p53表达水平
• Ki-67增殖指数
• CD34血管标记
• VEGF表达水平
• Bcl-2凋亡标记
• p16细胞周期蛋白
• ER（雌激素受体）表达
• PR（孕激素受体）表达
• HER3表达水平
• HER4表达水平
• mTOR信号通路蛋白
• AKT磷酸化水平
• STAT3激活状态
• NF-kB表达水平
• beta-catenin定位
• E-cadherin上皮标记
• N-cadherin间充质标记
• Vimentin表达水平
• Cytokeratin细胞骨架蛋白
• GFAP神经胶质标记
• Nestin干细胞标记
• SOX2多能性标记
• OCT4表达水平
• Nanog表达水平
• CD44干细胞标记
• CD133肿瘤干细胞标记
• ALDH1活性检测
• PSA前列腺特异性抗原
• CEA癌胚抗原
• AFP甲胎蛋白
• p21表达水平
• p27表达水平
• Cyclin D1细胞周期蛋白

检测范围

• 人类乳腺癌细胞系
• 小鼠肺癌模型组织
• 大鼠肝组织样本
• 猪心脏组织切片
• 猴肾细胞培养物
• 鸡胚胎细胞样本
• 斑马鱼组织切片
• 果蝇组织样本
• 酵母细胞涂片
• 人类干细胞培养物
• 小鼠胚胎成纤维细胞
• 人脐静脉内皮细胞
• 神经胶质细胞样本
• 心肌细胞培养物
• 肝细胞组织切片
• 肾细胞样本
• 肺上皮细胞培养物
• 肠上皮组织切片
• 皮肤成纤维细胞
• 骨细胞样本
• 脂肪细胞培养物
• 免疫细胞（如T细胞）
• 癌细胞系（如HeLa）
• 原代细胞培养物
• 福尔马林固定石蜡包埋组织
• 冰冻切片样本
• 细胞涂片样本
• 组织微阵列
• 活细胞成像样本
• 转基因动物模型组织

检测方法

• 免疫组化染色：使用酶标抗体进行 colorimetric detection 以可视化蛋白质表达。
• 免疫荧光染色：应用荧光标记抗体进行高灵敏度检测和定位。
• Western blot：通过电泳和抗体 probing 验证蛋白质表达水平。
• ELISA：酶联免疫吸附 assay 用于定量蛋白质浓度。
• 流式细胞术：分析细胞表面或细胞内蛋白表达 on a single-cell basis。
• 共聚焦显微镜：提供高分辨率三维成像 for detailed cellular localization。
• 电子显微镜：用于超微结构观察和蛋白质定位。
• 组织处理：包括固定、脱水、包埋和切片制备。
• 抗原修复：采用热或酶处理以暴露福尔马林固定样本的抗原表位。
• 阻断步骤：使用血清或 BSA 减少非特异性抗体结合。
• 抗体孵育： primary 和 secondary antibody incubation for specific binding。
• DAB 显色： peroxidase-based reaction for visible signal development。
• 荧光淬灭： minimize autofluorescence through chemical treatment。
• 核 counterstaining：应用 DAPI 或 hematoxylin 标记细胞核。
• 图像分析：使用软件工具量化染色强度和分布。
• 质量控制：包括阳性对照和阴性对照以确保实验准确性。
• RNA 提取：分离 RNA 以验证基因沉默效率。
• RT-PCR：反转录 PCR 检测 mRNA 表达水平。
• 细胞培养：维持细胞生长和状态 for experimentation。
• 转染技术：导入 siRNA 或 shRNA 进行基因沉默。
• 沉默效率检测：通过 qPCR 评估基因 knockdown 效果。
• 样本储存：低温保存以维持样本 integrity。
• 切片制备：使用 cryostat 或 microtome 制作薄片。
• 封片处理：应用 mounting medium 保护 slides for imaging。
• 显微镜检查： brightfield and fluorescence microscopy for observation。

检测仪器

• 显微镜
• 离心机
• 孵育箱
• 冰箱
• 冷冻机
• 切片机
• 水浴锅
• pH计
• 天平
• 移液器
• 电泳仪
• 凝胶成像系统
• 流式细胞仪
• 酶标仪
• PCR仪
• 实时PCR仪
• 超净工作台
• CO2培养箱
• 冷冻离心机
• 液氮罐