细胞沉默高通量筛选测试

信息概要

• 细胞沉默高通量筛选测试是一种基于RNA干扰技术的大规模基因功能评估服务，用于快速筛选有效沉默试剂并分析其生物学效应。
• 检测的重要性在于确保沉默效率、特异性和细胞安全性，从而支持药物发现、功能基因组研究和临床前验证，减少脱靶效应和假阳性结果。
• 此测试概括了从试剂优化、细胞处理到数据分析的完整流程，提供标准化、可重复的实验结果，助力科研和工业应用。

检测项目

• 沉默效率评估
• 细胞毒性测试
• 基因表达水平定量
• 蛋白质表达水平分析
• 细胞增殖率测定
• 细胞凋亡率检测
• 细胞周期分析
• 转染效率验证
• RNA干扰特异性评估
• 脱靶效应筛查
• 最小抑制浓度确定
• 剂量反应曲线绘制
• 时间点动态分析
• 细胞活力测定
• 细胞形态变化观察
• 基因敲低验证
• Western Blot定量分析
• qPCR验证实验
• 荧光显微镜成像分析
• 流式细胞术检测
• 高通量成像筛选
• 数据归一化处理
• 统计分析应用
• Z'-因子计算
• 筛选窗口评估
• 重复性测试
• 阳性对照验证
• 阴性对照验证
• 背景噪声评估
• 信号-to-noise比分析

检测范围

• siRNA
• shRNA
• miRNA mimics
• miRNA inhibitors
• CRISPR guide RNAs
• 反义寡核苷酸
• RNAi文库
• 质粒载体
• 慢病毒载体
• 腺病毒载体
• HEK293细胞系
• HeLa细胞系
• 原代细胞
• 干细胞
• 癌细胞系
• 免疫细胞
• 神经元细胞
• 上皮细胞
• 成纤维细胞
• 肝细胞
• 肾细胞
• 肺细胞
• 心脏细胞
• 肌肉细胞
• 血液细胞
• 组织样本
• 类器官
• 动物模型
• 酵母细胞
• 细菌细胞

检测方法

• qPCR: 定量检测mRNA表达水平，用于验证基因沉默效果。
• Western Blot: 分析蛋白质表达变化，确认沉默特异性。
• 流式细胞术: 测量细胞表面标志物或荧光信号，评估转染和沉默效率。
• 荧光显微镜: 观察细胞形态和荧光报告基因表达，提供视觉验证。
• MTT assay: 检测细胞活力，基于代谢活性评估毒性。
• CCK-8 assay: 另一种细胞活力测试方法，通过颜色imetric反应定量。
• 凋亡检测: 使用Annexin V staining等方法分析细胞死亡。
• 细胞周期分析: 通过PI staining评估DNA含量，确定周期阶段。
• 高通量筛选平台: 自动化 robotic systems 处理大量样本，提率。
• 微阵列: 用于基因表达谱分析，识别全局变化。
• RNA-seq: 高通量测序技术，全面分析转录组差异。
• ELISA: 检测特定蛋白质浓度，验证沉默影响。
• 免疫荧光: 定位蛋白质在细胞内的分布，结合显微镜成像。
• 报告基因 assay: 如 luciferase assay，测量启动子活性或沉默效果。
• 细胞迁移 assay: wound healing assay 评估细胞运动能力变化。
• 侵袭 assay: Transwell assay 分析细胞侵袭特性。
• 克隆形成 assay: 测试细胞增殖和存活能力。
• 蛋白质组学分析: mass spectrometry 识别蛋白质组变化。
• 代谢组学分析: 检测代谢物水平，评估沉默对代谢的影响。
• 数据挖掘和生物信息学分析: 用于结果解读和 pathway 分析。

检测仪器

• 流式细胞仪
• 实时PCR仪
• Western Blot系统
• 荧光显微镜
• 高通量筛选机器人
• 微阵列扫描仪
• 下一代测序仪
• 酶标仪
• 离心机
• 细胞培养箱
• 超净工作台
• 液氮罐
• 电泳系统
• 色谱仪
• 质谱仪