动物湿疹模型Western blot实验

信息概要

• 动物湿疹模型Western blot实验是一种用于研究湿疹发病机制的关键分子生物学技术，通过检测皮肤组织中特定蛋白质的表达变化，评估炎症反应、屏障功能和相关信号通路。
• 该检测服务由第三方机构提供，确保结果准确可靠，适用于药物研发、毒性评估和疾病模型验证，对理解湿疹分子基础和开发治疗方案至关重要。
• Western blot实验能够定量分析蛋白质水平，帮助识别生物标志物，为临床前研究提供数据支持，提高实验重复性和标准化。

检测项目

• IL-4蛋白质表达水平
• IL-13蛋白质表达水平
• TNF-α蛋白质表达水平
• IFN-γ蛋白质表达水平
• IL-1β蛋白质表达水平
• IL-6蛋白质表达水平
• IL-17蛋白质表达水平
• IL-22蛋白质表达水平
• IL-31蛋白质表达水平
• IL-33蛋白质表达水平
• TSLP蛋白质表达水平
• Filaggrin蛋白质表达水平
• Loricrin蛋白质表达水平
• Involucrin蛋白质表达水平
• Keratin 1蛋白质表达水平
• Keratin 10蛋白质表达水平
• Claudin-1蛋白质表达水平
• Occludin蛋白质表达水平
• ZO-1蛋白质表达水平
• EGFR蛋白质表达水平
• p-EGFR磷酸化状态
• STAT3蛋白质表达水平
• p-STAT3磷酸化状态
• NF-κB p65蛋白质表达水平
• p-NF-κB磷酸化状态
• MAPK蛋白质表达水平
• p-MAPK磷酸化状态
• JAK1蛋白质表达水平
• p-JAK1磷酸化状态
• JAK2蛋白质表达水平
• p-JAK2磷酸化状态
• JAK3蛋白质表达水平
• p-JAK3磷酸化状态
• STAT6蛋白质表达水平
• p-STAT6磷酸化状态
• AKT蛋白质表达水平
• p-AKT磷酸化状态
• mTOR蛋白质表达水平
• p-mTOR磷酸化状态

检测范围

• 炎症细胞因子
• Th2型细胞因子
• Th1型细胞因子
• Th17型细胞因子
• 皮肤屏障蛋白
• 紧密连接蛋白
• 角蛋白家族
• 信号转导蛋白
• 磷酸化蛋白
• 受体酪氨酸激酶
• 转录因子
• Janus激酶家族
• STAT蛋白家族
• MAPK通路蛋白
• NF-κB通路蛋白
• PI3K/AKT通路蛋白
• mTOR通路蛋白
• 细胞凋亡相关蛋白
• 自噬相关蛋白
• 氧化应激蛋白
• 免疫调节蛋白
• 生长因子
• 趋化因子
• adhesion分子
• 蛋白酶体蛋白
• 细胞周期蛋白
• 代谢相关蛋白
• 神经介质蛋白
• 微生物相关蛋白
• 药物靶点蛋白

检测方法

• SDS-PAGE电泳：用于蛋白质分离 based on molecular weight。
• 转印法：将蛋白质从凝胶转移到膜上，如PVDF或硝酸纤维素膜。
• 抗体孵育：使用一抗和二抗与目标蛋白质结合。
• 化学发光检测：通过酶促反应产生光信号进行可视化。
• ECL底物应用：增强化学发光信号 for sensitivity。
• 蛋白质定量：通过BCA或Bradford法测定样品蛋白质浓度。
• 样品制备：包括组织裂解、离心和蛋白质提取。
• blocking步骤：用BSA或脱脂牛奶减少非特异性结合。
• 洗涤步骤：使用TBST或PBS缓冲液去除未结合抗体。
• 内参蛋白检测：如β-actin或GAPDH，用于标准化。
• 灰度分析：通过软件量化蛋白质条带强度。
• 多重Western blot：同时检测多个蛋白质 on the same membrane。
• stripping和重 probing：去除抗体后重新检测其他蛋白质。
• 非还原电泳：用于检测二硫键依赖的蛋白质。
• 2D电泳结合Western blot：用于复杂蛋白质分离。
• 荧光Western blot：使用荧光标记抗体进行检测。
• 数字成像：用CCD相机或扫描仪捕获图像。
• 质量控制：包括阳性对照和阴性对照设置。
• 优化抗体浓度：通过滴定实验确定最佳抗体稀释度。
• 温度控制：在4°C或室温下进行孵育以优化结合。

检测仪器

• 电泳仪
• 转印装置
• 化学发光成像系统
• 微量离心机
• 涡旋混合器
• 恒温摇床
• pH计
• 天平
• 紫外分光光度计
• 凝胶成像系统
• 微量移液器
• 恒温水浴锅
• 冰箱
• 冷冻离心机
• 生物安全柜