信息概要
- 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种常见且具有重要临床意义的病原微生物，广泛存在于自然环境和人体中，是引起社区及医院内感染的主要原因之一。其某些菌株可产生多种毒素和侵袭性酶，导致食物中毒、皮肤感染、肺炎、败血症等多种疾病。
- 脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术是分子分型的“金标准”方法，通过稀有酶切位点的限制性内切酶对细菌全基因组DNA进行切割，产生大片段DNA，在脉冲电场中根据片段大小进行分离，形成特征性DNA指纹图谱，用于菌株间的同源性分析、溯源调查和爆发监控。
- 开展PFGE检测对公共卫生安全、医院感染控制及食品安全监管至关重要。它能精准识别感染源和传播途径，有效监控和预防疫情爆发，评估控制措施效果，为疾病防控和临床治疗提供关键科学依据。
检测项目
- 菌株复苏与纯培养
- 基因组DNA提取与纯化
- DNA浓度与纯度测定（A260/A280）
- 琼脂糖包埋块制备
- 细胞包埋与裂解
- 包埋块清洗与平衡
- 限制性内切酶选择（如SmaI）
- 基因组DNA原位酶切
- 酶切效率验证
- 脉冲场电泳参数优化
- 分子量标准品（Marker）选择
- 琼脂糖凝胶制备
- DNA片段在脉冲场中的分离
- 凝胶染色（如EB或GelRed）
- 凝胶成像与图谱捕获
- DNA指纹图谱分析
- 条带模式识别与判读
- 菌株间相似性计算
- 聚类分析（树状图生成）
- 结果解释与同源性判断
- 爆发菌株的识别
- 溯源分析
- 实验室间比对验证
- 数据标准化（按标准方案操作）
- 报告撰写与审核
- 检测限（LOD）验证
- 特异性验证
- 重复性/再现性评估
- 阳性对照菌株检测
- 阴性对照设置
- 质量控制与保证
- 生物安全风险评估
检测范围
需要检测，但不确定项目与标准？工程师为您一对一制定检测方案
- 临床分离株（血液、痰液、脓液、尿液等）
- 食源性分离株（肉类、乳制品、糕点等）
- 环境监测分离株（物体表面、空气、水样等）
- 社区获得性感染菌株
- 医院内感染（HA-MRSA）菌株
- 社区相关性（CA-MRSA）菌株
- livestock-associated (LA-MRSA) 菌株
- 甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）
- 万古霉素中介金黄色葡萄球菌（VISA）
- 万古霉素耐药金黄色葡萄球菌（VRSA）
- 产Pantone-Valentine杀白细胞素（PVL）菌株
- 产中毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）菌株
- 产肠毒素（SEA, SEB, etc.）菌株
- 新生儿感染相关菌株
- 手术部位感染相关菌株
- 呼吸机相关性肺炎相关菌株
- 菌血症/败血症相关菌株
- 皮肤及软组织感染相关菌株
- 动物源性菌株
- 抗生素耐药性监测菌株
- 疫情爆发调查涉及的菌株
- 特定克隆系（如ST239, ST5, ST8）
- 食品安全监测样本中的菌株
- 药品及化妆品污染菌株
- 科研用参考菌株（如ATCC标准菌株）
- 疫苗株
- 环境持久性菌株
- 生物膜形成相关菌株
- 高致病性菌株
检测方法
检测报告可以为您解决：产品出厂检验与质量验收科研项目立项与结题依据招投标与采购方要求的资质证明进出口通关与国际互认（CNAS）生产工艺改进与失效分析电商平台使用
- 脉冲场凝胶电泳（PFGE）: 核心方法，利用交替变换方向的电场分离大分子量DNA片段。
- 标准菌株制备: 按照CLSI指南进行菌株的复苏和纯培养，确保菌株活性与纯度。
- 胶块制备: 将细菌细胞包埋于低熔點琼脂糖胶块中，以保持DNA完整性。
- 细胞裂解: 使用裂解液（含溶菌酶、蛋白酶K）裂解胶块中的细胞，释放基因组DNA。
- 胶块清洗: 用TE缓冲液等清洗胶块，去除细胞碎片、蛋白质和酶等杂质。
- 限制性酶切: 使用SmaI等稀有切割位点的限制性内切酶对胶块内DNA进行原位酶切。
- 酶切效率验证: 通过常规琼脂糖电泳检查酶切是否完全，确保DNA已被有效切割。
- 琼脂糖凝胶灌制: 制备特定浓度的琼脂糖凝胶，用于装载酶切后的DNA样品。
- DNA样品的装载: 将酶切后的胶块切片嵌入凝胶加样孔中。
- 脉冲场电泳运行: 在特定脉冲时间、电压、角度和缓冲液条件下进行电泳分离。
- 分子量标准的使用: 同时电泳λ ladder等标准品，用于确定DNA片段大小。
- 凝胶染色: 电泳后使用溴化乙锭（EB）或其他核酸染料对凝胶进行染色。
- 凝胶成像: 在紫外透射仪或凝胶成像系统下观察并采集DNA指纹图谱。
- 图像分析: 使用BioNumerics等软件对指纹图谱进行数字化和分析。
- 条带判读: 根据条带的位置、强度和数量进行人工辅助的软件自动识别。
- 相似性分析: 采用Dice系数等算法计算菌株图谱间的相似度。
- 聚类分析: 使用UPGMA等方法生成树状图，直观展示菌株间的亲缘关系。
- 结果解释标准: 采用Tenover标准等对菌株同源性进行判读，确定是否属于同一克隆。
- 质量控制: 在每批实验中包括阳性对照和阴性对照，确保结果可靠。
- 数据标准化与比对: 将图谱与实验室内部数据库或国家数据库进行比对。
检测仪器
- 脉冲场电泳仪（如CHEF-DR® III System）
- 恒温培养箱
- 生物安全柜
- 高压蒸汽灭菌器
- 涡旋混合器
- 高速离心机
- 微量移液器
- 核酸蛋白测定仪
- 微波炉
- 水平电泳槽
- 凝胶成像系统
- 紫外分光光度计
- 水浴锅
- 胶块模具
- 脱色摇床
机构信息
机构名称：北京中科光析科学技术研究所
简称：中析研究所
单位性质：集体所有制（股份合作）科研检测单位
隶属单位：北京前沿科学技术研究院
机构定位：以科研检测为主的科学技术研究机构；第三方分析测试技术服务单位
资质认可：旗下实验室获得CMA检验检测机构资质认定与CNAS实验室认可
机构荣誉：国家高新技术企业、中关村高新技术企业
检测方针：公正、科学、准确、优质
执业原则：严谨、诚信
经营理念：以客户需求为中心，真正解决顾客难题
服务内容：研发设计、分析检测、试验验证、共性加工、信息及知识产权等
服务行业：航空航天、军工科研、高端制造、新能源与节能环保、石油化工、生物医药、电子信息、新材料研发、汽车及轨道交通、建筑建材等
