细胞流式周期检测

信息概要

• 细胞流式周期检测是一种通过流式细胞术对细胞周期时相（G0/G1期、S期、G2/M期）进行准确定量和分析的技术。
• 该检测对于研究细胞增殖、分化、凋亡以及评估药物或基因处理对细胞周期的影响至关重要，是肿瘤学、免疫学、药物开发等生命科学领域的核心研究手段。
• 本服务提供从样本制备、染色到上机检测及数据分析的一站式解决方案，确保结果准确可靠。

检测项目

• 细胞周期G0/G1期百分比
• 细胞周期S期百分比
• 细胞周期G2/M期百分比
• 细胞增殖指数（Proliferative Index）
• DNA含量（DNA Content）
• 倍体性分析（Ploidy Analysis）
• 非整倍体细胞比例
• 细胞凋亡率（Apoptotic Rate）
• cyclin蛋白表达水平
• CDK（周期蛋白依赖性激酶）活性
• 磷酸化组蛋白H3（pHH3）表达
• Ki-67增殖标志物表达
• Brdu掺入率
• EdU掺入率
• Annexin V结合能力
• Caspase活性检测
• 线粒体膜电位（ΔΨm）
• 活性氧（ROS）水平
• 细胞大小（FSC）
• 细胞粒度（SSC）
• 细胞核质比
• 细胞集群性分析
• 细胞周期同步化效率
• 药物IC50对周期的影响
• 基因沉默/过表达对周期的影响
• 照射（辐射）对周期的影响
• 细胞周期检查点功能
• DNA损伤响应（如γH2AX）
• 细胞衰老标志物（如SA-β-Gal）
• 细胞周期相关基因mRNA表达（联用其他技术）

检测范围

• 贴壁细胞系（如HeLa, HEK293）
• 悬浮细胞系（如Jurkat, THP-1）
• 原代培养细胞
• 干细胞（胚胎干细胞、诱导多能干细胞）
• 肿瘤细胞
• 免疫细胞（T细胞、B细胞、NK细胞）
• 血细胞
• 组织原代细胞（如肝细胞、神经元）
• 细菌细胞
• 酵母细胞
• 植物细胞
• 昆虫细胞
• 耐药细胞系
• 基因编辑细胞系（如CRISPR-Cas9编辑）
• 病毒感染细胞
• 细胞治疗产品（如CAR-T细胞）
• 肿瘤组织消化样本
• 骨髓样本
• 外周血单核细胞（PBMCs）
• 淋巴结细胞
• 脾脏细胞
• 胸腺细胞
• 腹水细胞
• 细针穿刺样本
• 新鲜实体组织切片
• 石蜡包埋组织解离样本
• 冷冻保存的细胞样本
• 3D细胞培养物（类器官）
• 微流控芯片培养细胞
• 模式生物胚胎细胞

检测方法

• PI染色法：利用碘化丙啶（Propidium Iodide）嵌入DNA进行染色，是最经典的DNA含量检测方法。
• DAPI染色法：使用DAPI（4',6-二脒基-2-苯基吲哚）与DNA双链中的A-T富集区结合进行染色。
• Hoechst染色法：利用Hoechst 33342等染料与DNA小沟结合，可用于活细胞周期分析。
• Brdu抗体标记法：通过检测掺入DNA的Brdu（溴脱氧尿苷）来识别S期细胞。
• EdU点击化学法：利用EdU（5-乙炔基-2'-脱氧尿苷）掺入后与荧光染料进行点击化学反应，检测S期细胞。
• Annexin V/PI双染法：区分凋亡不同时期的细胞（早期凋亡、晚期凋亡、坏死）。
• Cyclin蛋白抗体标记法：通过特异性抗体对周期蛋白（如Cyclin D1, E, A, B1）进行细胞内染色。
• 磷酸化靶标抗体检测法：检测细胞周期关键蛋白的磷酸化状态（如Rb蛋白、CDC2）。
• pHH3（磷酸化组蛋白H3）抗体标记法：特异性识别和定量处于有丝分裂期（M期）的细胞。
• Ki-67抗体标记法：通过检测与细胞增殖相关的核抗原Ki-67来评估增殖活性。
• Caspase活性检测法：使用荧光标记的抑制剂或底物来检测凋亡过程中Caspase酶的活化。
• JC-1染色法：通过荧光颜色变化（红/绿）来检测线粒体膜电位的变化，间接反映细胞健康状况。
• DCFH-DA探针法：检测细胞内活性氧（ROS）水平。
• DNA染料与抗体联合标记法：同时分析DNA含量和特定蛋白表达（如表面标志物或细胞内蛋白）。
• 多参数流式细胞术：同时使用多种荧光染料和抗体，对细胞周期进行更精细的分辨和分析。
• 脉冲追踪分析（Pulse-Chase）：结合Brdu/EdU标记，追踪细胞在周期中的进程。
• DNA RNA共同染色法：使用Pyronin Y等染料染色RNA，结合DNA染料区分G0和G1期细胞。
• 细胞同步化处理后检测：如胸腺双阻断法、诺考达唑处理后的释放实验。
• 核仁抗原染色法：用于某些特定类型的细胞周期分析。
• 微球体校准法：使用标准荧光微球对仪器进行校准，确保检测结果的准确性和可比性。

检测仪器

• BD FACSCelesta
• BD LSRFortessa
• BD FACSymphony
• Beckman Coulter CytoFLEX
• Beckman Coulter MoFlo Astrios EQ
• Sony ID7000
• Miltenyi Biotec MACSQuant
• Thermo Fisher Attune NxT
• BD Accuri C6
• Cytek Aurora
• Beckman Coulter Navios
• BD FACSVerse
• Agilent NovoCyte
• Bio-Rad ZE5
• Union Biometrica COPAS