小鼠主动脉弓狭窄呼吸链实验

信息概要

• 小鼠主动脉弓狭窄（TAAC）呼吸链实验是评估心脏压力超负荷模型中心肌细胞线粒体功能的核心手段。该产品/项目通过模拟主动脉弓狭窄构建小鼠病理性心肌肥厚与心力衰竭模型，随后对心肌组织中线粒体呼吸链复合体的活性与功能进行精准定量分析。
• 检测的重要性在于，线粒体功能障碍是心力衰竭发生发展的关键环节。准确评估呼吸链复合体活性，对于深入研究疾病机制、筛选和评价保护心肌线粒体功能的药物或干预措施至关重要，是心血管研究领域不可或缺的临床前药效与机制评价服务。
• 本检测信息概括了对心肌组织线粒体分离纯化后，呼吸链复合体I-V的酶活性、耗氧率(OCR)等关键参数的标准化测定服务，提供客观、准确的数据以支持科学研究。

检测项目

• 复合体I (NADH-辅酶Q还原酶) 活性
• 复合体II (琥珀酸-辅酶Q还原酶) 活性
• 复合体III (辅酶Q-细胞色素C还原酶) 活性
• 复合体IV (细胞色素C氧化酶) 活性
• 复合体V (ATP合酶) 活性
• 线粒体基础呼吸速率
• ATP合成相关呼吸速率
• 最大呼吸容量
• 质子漏呼吸速率
• 呼吸控制率(RCR)
• ADP/O比值
• 线粒体膜电位
• 线粒体活性氧(ROS)产生速率
• 线粒体膜通透性转换孔(mPTP)开放程度
• 线粒体细胞色素C释放量
• 线粒体钙离子摄取能力
• 线粒体形态学观察（电镜图片分析）
• 线粒体DNA拷贝数
• 线粒体蛋白质含量
• 丙酮酸脱氢酶复合体活性
• α-酮戊二酸脱氢酶复合体活性
• 苹果酸脱氢酶活性
• 柠檬酸合酶活性
• 肉碱棕榈酰转移酶-1 (CPT-1) 活性
• 脂肪酸β-氧化速率
• 谷胱甘肽(GSH)含量
• 氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量
• GSH/GSSG比值
• 超氧化物歧化酶(SOD)活性
• 过氧化氢酶(CAT)活性
• ATP含量
• ADP含量
• AMP含量
• 能荷(Energy Charge)
• 乳酸含量
• 丙酮酸含量

检测范围

• C57BL/6小鼠心肌组织
• BALB/c小鼠心肌组织
• ICR小鼠心肌组织
• KM小鼠心肌组织
• FVB/N小鼠心肌组织
• ApoE敲除小鼠心肌组织
• db/db糖尿病小鼠心肌组织
• ob/ob肥胖小鼠心肌组织
• SCD1敲除小鼠心肌组织
• PGC-1α过表达小鼠心肌组织
• 心肌特异性过表达模型小鼠心肌组织
• 心肌特异性敲除模型小鼠心肌组织
• 压力超负荷模型小鼠心肌组织
• 缺血再灌注模型小鼠心肌组织
• 阿霉素诱导心衰模型小鼠心肌组织
• 心肌梗死模型小鼠心肌组织
• 主动脉缩窄模型小鼠心肌组织
• 肺动脉高压模型小鼠心肌组织
• 衰老模型小鼠心肌组织
• 高脂饮食诱导模型小鼠心肌组织
• 运动训练模型小鼠心肌组织
• 药物治疗后模型小鼠心肌组织
• 基因治疗后模型小鼠心肌组织
• 干细胞治疗后模型小鼠心肌组织
• 离体心脏灌流模型心肌组织
• 原代心肌细胞线粒体
• H9c2心肌细胞系线粒体
• HL-1心肌细胞系线粒体
• AC16心肌细胞系线粒体
• iPS来源心肌细胞线粒体

检测方法

• 分光光度法：通过测定特定波长下吸光度的变化来定量酶活性。
• 极谱氧电极法：使用氧电极实时监测溶液中氧浓度的变化，以测定耗氧速率。
• 液相色谱法(HPLC)：分离并定量分析如核苷酸、辅酶等物质。
• 液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)：高灵敏度、高特异性地定量复杂样品中的小分子代谢物。
• 荧光检测法：利用荧光探针标记目标分子，通过检测荧光强度变化进行定量。
• 化学发光法：通过检测化学反应产生的光信号来测定抗氧化酶活性等。
• Western Blot：检测特定线粒体蛋白的表达水平。
• 免疫共沉淀：研究蛋白质间的相互作用。
• 酶联免疫吸附测定(ELISA)：定量检测特定蛋白质或细胞因子的含量。
• 流式细胞术：在细胞水平检测线粒体膜电位、活性氧等参数。
• 共聚焦显微镜成像：对活细胞或组织中的线粒体进行形态和功能实时观测。
• 电子显微镜：观察线粒体的超微结构。
• 原子力显微镜：在纳米级别研究线粒体膜表面结构。
• Seahorse XF分析仪实时细胞能量代谢检测：实时无损检测细胞耗氧率和酸化率。
• 等温滴定 calorimetry (ITC)：研究生物分子相互作用的结合常数、焓变等热力学参数。
• 膜片钳技术：研究线粒体离子通道的功能。
• 实时荧光定量PCR (qPCR)：检测线粒体DNA拷贝数及核DNA编码的线粒体相关基因表达。
• RNA-Seq：全转录组水平分析基因表达谱。
• 蛋白组学分析：大规模鉴定和定量线粒体蛋白质组。
• 代谢组学分析：系统性分析内源性小分子代谢物。

检测仪器

• 紫外-可见分光光度计
• 氧电极测定系统
• 液相色谱仪(HPLC)
• 液相色谱-质谱联用仪(LC-MS/MS)
• 荧光分光光度计
• 化学发光检测仪
• 凝胶成像系统
• Western Blot电泳及转印系统
• 酶标仪
• 流式细胞仪
• 共聚焦显微镜
• 透射电子显微镜
• 扫描电子显微镜
• Seahorse XF分析仪
• 等温滴定 calorimeter
• 膜片钳放大器系统
• 实时荧光定量PCR仪
• 超速离心机
• 组织匀浆器
• 低温冰箱
• 多功能微孔板检测仪