小鼠坐骨神经Western blot测试

信息概要

• 小鼠坐骨神经Western blot测试是一种用于检测神经组织中特定蛋白表达的高通量技术，广泛应用于神经科学研究。
• 该测试对于研究坐骨神经损伤、再生、疾病机制以及药物开发至关重要，提供准确的蛋白定量和定性数据。
• 第三方检测机构提供服务，包括样本处理、电泳、转印和信号检测，确保结果可靠性和可重复性。
• 检测服务涵盖多种蛋白靶点，支持科学研究、临床前试验和生物标志物发现。

检测项目

• GAP-43
• Neurofilament Heavy Chain (NF-H)
• S100β
• Beta-III Tubulin
• Myelin Basic Protein (MBP)
• Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP)
• Nogo-A
• MAG
• PMP22
• ErbB2
• TrkA
• p75NTR
• BDNF
• NGF
• GDNF
• CNTF
• Nestin
• Vimentin
• Actin
• Tubulin
• GAPDH
• Syntaxin
• Synaptophysin
• PSd-95
• NMDA Receptor
• AMPA Receptor
• Sodium Channel Nav1.7
• Potassium Channel Kv1.1
• Calcium Channel Cav2.2
• Acetylcholine Receptor
• Serotonin Transporter
• Dopamine Transporter
• Tyrosine Hydroxylase
• Parvalbumin
• Calbindin

检测范围

• 神经营养因子
• 细胞骨架蛋白
• 髓鞘蛋白
• 离子通道
• 受体蛋白
• 突触蛋白
• 神经递质相关蛋白
• 凋亡相关蛋白
• 自噬相关蛋白
• 炎症因子
• 氧化应激蛋白
• 代谢酶
• 信号转导蛋白
• 转录因子
• 细胞粘附分子
• 细胞周期蛋白
• 神经干细胞标记
• 胶质细胞标记
• 神经元标记
• 轴突标记
• 树突标记
• 突触前蛋白
• 突触后蛋白
• 神经肌肉接头蛋白
• 疼痛相关蛋白
• 神经退行性疾病相关蛋白
• 神经再生相关蛋白
• 神经发育相关蛋白
• 神经保护蛋白
• 神经毒性蛋白
• 细胞外基质蛋白
• 膜蛋白
• 胞质蛋白
• 核蛋白
• 线粒体蛋白

检测方法

• 样本制备: 使用裂解液提取坐骨神经组织中的总蛋白。
• 蛋白定量: 采用BCA法测定蛋白浓度，确保加载量一致。
• SDS-PAGE电泳: 根据分子量分离蛋白，使用变性凝胶。
• 转印: 将蛋白从凝胶转移到PVDF或NC膜上。
• 封闭: 用脱脂牛奶或BSA封闭膜上的非特异性结合位点。
• 一抗孵育: 与特定一抗在4°C下过夜孵育。
• 二抗孵育: 与HRP或荧光标记的二抗室温孵育。
• 化学发光检测: 使用ECL底物显影蛋白条带。
• 图像获取: 用凝胶成像系统捕获化学发光信号。
• 密度分析: 使用软件分析条带密度，进行定量。
• 内参蛋白检测: 如β-actin或GAPDH作为加载控制。
• 抗体验证: 通过阳性对照验证抗体特异性和灵敏度。
• 条件优化: 优化抗体稀释度、孵育时间和温度。
• 膜再生: stripping膜后重新 probing其他蛋白。
• 定量Western blot: 使用荧光二抗进行准确定量。
• 数字化Western blot: 采用自动化系统如Simple Western。
• 蛋白提取优化: 针对神经组织优化裂解缓冲液成分。
• 电泳条件优化: 调整凝胶浓度和电泳电压/时间。
• 转印效率检查: 用丽春红染色验证蛋白转印完整性。
• 信号线性范围确定: 通过稀释系列确保检测在动态范围内。
• 背景减少: 优化洗涤步骤以减少非特异性信号。
• 多重检测: 同时检测多个蛋白 using different fluorescent labels。

检测仪器

• 电泳仪
• 转印装置
• 凝胶成像系统
• 微量分光光度计
• 离心机
• 振荡器
• 孵育箱
• 化学发光检测仪
• 荧光扫描仪
• 蛋白定量仪
• 冰箱
• 冷冻离心机
• 水浴锅
• 磁力搅拌器
• pH计
• 天平
• 移液器
• 微波炉
• 摇床
• 紫外可见分光光度计