大鼠肝脏灌流PI3K/Akt检测

信息概要

大鼠肝脏灌流PI3K/Akt检测是一种专注于研究肝脏信号通路的检测服务，通过灌流技术模拟体内环境，精准评估PI3K/Akt信号通路的活性与调控机制。该检测在药物研发、代谢疾病研究及毒性评估中具有重要价值，能够为肝脏相关疾病的机制研究和治疗策略提供关键数据支持。

PI3K/Akt信号通路是细胞增殖、存活和代谢的核心调控者，其异常激活或抑制与多种肝脏疾病（如脂肪肝、肝纤维化和肝癌）密切相关。通过灌流技术结合分子检测，可动态分析通路中关键蛋白的磷酸化水平、表达量及相互作用，为科研与临床提供可靠依据。

检测项目

• PI3K活性检测：测定PI3K酶在肝脏灌流样本中的催化活性
• Akt磷酸化水平：定量分析Akt蛋白在Ser473和Thr308位点的磷酸化状态
• PDK1活性：检测磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1的激活程度
• mTORC1复合物形成：评估mTOR与Raptor的结合效率
• mTORC2复合物形成：分析mTOR与Rictor的相互作用
• GSK-3β磷酸化：测定糖原合成酶激酶3β的抑制状态
• FoxO1核转位：观察转录因子FoxO1的胞质-核穿梭变化
• PIP3含量：量化磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸的生成量
• PTEN活性：检测抑癌基因PTEN的脂质磷酸酶活性
• IRS-1酪氨酸磷酸化：分析胰岛素受体底物1的激活状态
• p85调节亚单位结合：评估PI3K p85亚基与磷酸化蛋白的结合能力
• TSC1/TSC2复合物稳定性：检测结节性硬化复合物的完整性
• Rheb-GTP负载：测定Ras同源蛋白的GTP结合状态
• S6K1磷酸化：监控核糖体蛋白S6激酶的激活水平
• 4E-BP1磷酸化：评估真核起始因子4E结合蛋白的调控状态
• BAD磷酸化：检测促凋亡蛋白BAD的抑制程度
• c-Raf抑制：分析Akt对Raf激酶的负调控作用
• eNOS激活：测定内皮型一氧化氮合酶的活性变化
• MDM2核转位：观察E3泛素连接酶的亚细胞定位
• p53稳定性：检测肿瘤抑制蛋白p53的降解速率
• NF-κB激活：评估核因子κB的转录活性
• HIF-1α表达：监测缺氧诱导因子1α的蛋白积累
• GLUT4膜移位：分析葡萄糖转运体4的细胞膜定位变化
• 糖原合成速率：定量肝脏灌流系统中的糖原生成效率
• 脂质合成标记：检测脂肪酸合成酶的表达与活性
• 线粒体膜电位：评估Akt调控的线粒体功能完整性
• 凋亡标志物检测：分析Caspase-3/-9等凋亡相关蛋白的活化
• 自噬流监测：通过LC3-II/Ⅰ比值评估自噬活性
• ROS水平：测定活性氧物种的生成量变化
• ATP含量：量化肝细胞能量代谢状态

检测范围

• PI3K亚型检测
• Akt异构体分析
• 磷酸化抗体芯片
• 激酶活性谱
• 信号通路抑制剂筛选
• 代谢组学关联分析
• 基因敲除模型验证
• 药物诱导通路调控
• 氧化应激响应检测
• 胰岛素敏感性评估
• 肝脏再生研究
• 肿瘤发生机制分析
• 纤维化进程监控
• 脂毒性评估
• 糖代谢紊乱研究
• 线粒体功能检测
• 细胞周期调控分析
• 凋亡抵抗性检测
• 自噬通量测定
• 蛋白互作网络构建
• 转录组学联合分析
• 表观遗传修饰研究
• 微生物组-肝脏轴影响
• 昼夜节律调控
• 衰老相关通路检测
• 性别差异比较
• 营养干预研究
• 环境毒素影响评估
• 运动代谢适应
• 基因治疗效应监测

检测方法

• Western Blotting：蛋白质表达与磷酸化的半定量分析
• ELISA：特定磷酸化蛋白的高通量定量检测
• 免疫沉淀：蛋白复合物的分离与组分分析
• 激酶活性测定：放射性或荧光标记的底物磷酸化检测
• 质谱磷酸化组学：全局性磷酸化位点鉴定与定量
• 免疫荧光染色：亚细胞定位与共定位研究
• 流式细胞术：单细胞水平的信号通路活性检测
• 实时细胞分析：动态监测通路激活的动力学特征
• 毛细管电泳：高分辨率分离磷酸化蛋白异构体
• 表面等离子共振：分子相互作用的实时动力学分析
• 微量热泳动：溶液状态下蛋白-小分子结合常数测定
• 荧光偏振：快速检测小分子抑制剂与激酶的结合
• 生物膜干涉技术：无标记的分子相互作用分析
• 同位素标记：代谢流与磷酸化通路的整合分析
• 数字PCR：通路相关基因的绝对定量
• RNA-seq：转录组水平调控网络解析
• ChIP-seq：转录因子与DNA结合的基因组定位
• 代谢组分析：下游代谢产物的系统性检测
• 氧消耗率测定：Seahorse技术分析线粒体功能
• 钙离子成像：Akt调控的钙信号动态监测
• 双分子荧光互补：活细胞内蛋白相互作用可视化
• 蛋白质芯片：高通量筛选通路调控蛋白
• 原子力显微镜：纳米级蛋白构象变化观测
• 冷冻电镜：大分子复合物的高分辨率结构解析
• 微透析技术：活体实时采集灌流液中的代谢物

检测仪器

• 液相色谱-质谱联用仪
• 激光共聚焦显微镜
• 流式细胞分选仪
• 实时荧光定量PCR仪
• 多功能酶标仪
• 蛋白质电泳系统
• 转印系统
• 化学发光成像系统
• 表面等离子共振仪
• 微量热泳动仪
• 生物膜干涉分析仪
• Seahorse细胞能量代谢分析仪
• 毛细管电泳仪
• 原子力显微镜
• 冷冻电镜