CAR-T细胞AO/PI染色检测

信息概要

CAR-T细胞AO/PI染色检测是一种用于评估CAR-T细胞活性和存活率的关键技术。该检测通过吖啶橙（AO）和碘化丙啶（PI）双染色法，区分活细胞、凋亡细胞和死细胞，为CAR-T疗法的质量控制提供重要依据。该检测对于确保CAR-T细胞产品的安全性和有效性至关重要，广泛应用于临床前研究、生产工艺优化及终产品放行检测。

检测项目

• 细胞存活率：评估CAR-T细胞中活细胞的比例
• 细胞凋亡率：检测早期和晚期凋亡细胞的比例
• 细胞坏死率：确定死亡细胞的比例
• 细胞总数：计算样本中总细胞数量
• 活细胞浓度：测定每毫升中活细胞的数量
• 细胞形态评估：观察细胞的形态学变化
• 细胞大小分布：分析细胞直径的分布情况
• 细胞颗粒度：评估细胞内颗粒物质的含量
• 细胞聚集状态：检测细胞是否形成聚集体
• 细胞周期分析：确定细胞处于哪个细胞周期阶段
• 线粒体膜电位：评估线粒体功能状态
• 细胞膜完整性：检测细胞膜的完整性
• 细胞内pH值：测量细胞内部的酸碱度
• ROS水平：检测细胞内活性氧物种的含量
• 钙离子浓度：测定细胞内钙离子水平
• 细胞表面标志物表达：分析特定表面蛋白的表达
• CAR表达率：检测CAR分子在细胞表面的表达
• 细胞增殖能力：评估细胞的增殖潜力
• 细胞毒性：测定CAR-T细胞对靶细胞的杀伤能力
• 细胞因子分泌：检测细胞分泌的细胞因子水平
• 端粒酶活性：评估细胞的端粒酶活性
• DNA含量：测定细胞内DNA的总量
• RNA含量：检测细胞内RNA的水平
• 蛋白质含量：测定细胞内总蛋白含量
• 细胞代谢活性：评估细胞的代谢状态
• 细胞粘附能力：检测细胞粘附到基质的能力
• 细胞迁移能力：评估细胞的迁移潜力
• 细胞侵袭能力：测定细胞穿过基质的能力
• 细胞电生理特性：记录细胞的电生理参数
• 细胞信号通路活性：分析关键信号通路的激活状态

检测范围

• 自体CAR-T细胞
• 异体CAR-T细胞
• CD19靶向CAR-T细胞
• BCMA靶向CAR-T细胞
• CD22靶向CAR-T细胞
• CD33靶向CAR-T细胞
• GD2靶向CAR-T细胞
• HER2靶向CAR-T细胞
• EGFR靶向CAR-T细胞
• 间皮素靶向CAR-T细胞
• PSMA靶向CAR-T细胞
• Claudin18.2靶向CAR-T细胞
• GPC3靶向CAR-T细胞
• CD123靶向CAR-T细胞
• CD30靶向CAR-T细胞
• CD38靶向CAR-T细胞
• CD7靶向CAR-T细胞
• CD5靶向CAR-T细胞
• CD4靶向CAR-T细胞
• CD8靶向CAR-T细胞
• NKG2D靶向CAR-T细胞
• IL-13Rα2靶向CAR-T细胞
• MUC1靶向CAR-T细胞
• CEA靶向CAR-T细胞
• AFP靶向CAR-T细胞
• WT1靶向CAR-T细胞
• NY-ESO-1靶向CAR-T细胞
• MAGE-A3靶向CAR-T细胞
• PRAME靶向CAR-T细胞
• SSX2靶向CAR-T细胞

检测方法

• 流式细胞术：利用激光检测荧光标记的细胞
• 荧光显微镜：观察荧光标记细胞的形态和分布
• 共聚焦显微镜：获取细胞的三维荧光图像
• 细胞计数仪：自动计数细胞数量和存活率
• 酶联免疫吸附试验：检测特定蛋白的表达水平
• Western blotting：分析特定蛋白质的表达和修饰
• 实时荧光定量PCR：测定特定基因的表达水平
• ELISPOT：检测单个细胞分泌的细胞因子
• 细胞毒性试验：评估CAR-T细胞的杀伤能力
• 细胞增殖试验：测定细胞的增殖速率
• 细胞周期分析：确定细胞所处的周期阶段
• 钙成像：监测细胞内钙离子浓度的变化
• 膜电位检测：评估细胞膜电位的变化
• 活性氧检测：测定细胞内活性氧的水平
• ATP检测：评估细胞的能量代谢状态
• 乳酸脱氢酶释放试验：检测细胞膜的完整性
• 台盼蓝染色：区分活细胞和死细胞
• Annexin V-FITC/PI双染：检测凋亡细胞
• JC-1染色：评估线粒体膜电位
• CFSE标记：追踪细胞分裂次数
• Transwell迁移试验：评估细胞迁移能力
• Boyden chamber侵袭试验：测定细胞侵袭能力
• 细胞粘附试验：评估细胞粘附能力
• 电生理记录：测量细胞的电生理特性
• 质谱分析：检测细胞内代谢物的变化

检测仪器

• 流式细胞仪
• 荧光显微镜
• 共聚焦显微镜
• 自动细胞计数器
• 酶标仪
• Western blotting系统
• 实时荧光定量PCR仪
• ELISPOT阅读器
• 细胞培养箱
• 生物安全柜
• 离心机
• 超低温冰箱
• 液氮罐
• 电生理记录系统
• 质谱仪