脉冲场凝胶电泳

信息概要

脉冲场凝胶电泳（PFGE）是一种用于分离大分子DNA的高分辨率电泳技术，广泛应用于微生物分型、流行病学调查和基因组分析等领域。该技术通过交替变换电场方向，使DNA分子在凝胶中有效分离，尤其适用于细菌、真菌等微生物的基因分型和溯源研究。

检测脉冲场凝胶电泳产品的重要性在于其能够提供高精度的DNA片段大小信息，帮助识别病原体、追踪疫情源头以及评估基因重组事件。第三方检测机构通过的PFGE服务，为客户提供准确、可靠的检测数据，支持科研、医疗和公共卫生决策。

本服务涵盖从样品制备到数据分析的全流程，确保检测结果的科学性和可重复性，为微生物基因组研究提供强有力的技术支持。

检测项目

• DNA片段大小分析
• 细菌菌株分型
• 真菌基因组分型
• 病原体溯源分析
• 基因组重排检测
• 质粒大小测定
• 染色体异常检测
• 微生物多样性评估
• 流行病学关联分析
• 基因克隆验证
• DNA甲基化影响评估
• 抗生素耐药基因定位
• 病毒基因组分析
• 环境微生物群落研究
• 食品致病菌检测
• 临床病原体鉴定
• 基因工程菌株验证
• 古DNA片段分析
• 转基因生物检测
• 生物安全评估

检测范围

• 革兰氏阳性细菌
• 革兰氏阴性细菌
• 酵母菌
• 丝状真菌
• 乳酸菌
• 大肠杆菌
• 沙门氏菌
• 金黄色葡萄球菌
• 链球菌
• 李斯特菌
• 弧菌
• 芽孢杆菌
• 梭菌
• 假单胞菌
• 肠球菌
• 分支杆菌
• 军团菌
• 弯曲菌
• 诺如病毒
• 噬菌体

检测方法

• 琼脂糖包埋法：将DNA样品包埋在琼脂糖凝胶块中，防止机械剪切
• 细胞裂解法：使用蛋白酶和去污剂裂解细胞，释放完整DNA
• DNA限制性酶切：用稀有切割限制酶处理DNA，产生大片段
• 电场交替切换：通过周期性改变电场方向分离大片段DNA
• 凝胶染色：利用溴化乙锭或SYBR Green染色显示DNA条带
• 图像采集：通过紫外透射仪拍摄凝胶图像
• 数据分析：使用软件分析条带模式
• 分子量标定：用已知大小的DNA标记物校准片段大小
• 脉冲时间优化：根据DNA大小范围调整脉冲时间
• 温度控制：保持恒定电泳温度确保结果重现性
• 缓冲液循环：保持缓冲液pH和离子强度稳定
• 凝胶浓度选择：根据DNA片段大小选择适当凝胶浓度
• 电泳参数标准化：建立可重复的运行条件
• 质量控制：包括阳性对照和阴性对照
• 结果验证：通过重复实验确认关键发现

检测仪器

• 脉冲场凝胶电泳仪
• 电泳槽系统
• 恒温循环水浴
• 紫外透射仪
• 凝胶成像系统
• 高速离心机
• 微型离心机
• 水浴锅
• 磁力搅拌器
• pH计
• 电子天平
• 微波炉
• 涡旋混合器
• 微量移液器
• 超纯水系统