抗体药物偶联物测序测试

信息概要

抗体药物偶联物（ADC）测序测试是一种针对抗体药物偶联物的关键质量控制手段，通过对ADC的氨基酸序列、连接位点、药物负载比等进行分析，确保其结构完整性和功能一致性。该检测对于ADC药物的研发、生产及临床前研究至关重要，能够帮助制药企业优化工艺、降低风险并满足监管要求。

检测项目

• 氨基酸序列分析：确定ADC抗体的完整氨基酸序列。
• 药物抗体比（DAR）测定：量化每个抗体分子上连接的药物分子数量。
• 连接位点鉴定：确认小分子药物与抗体的具体结合位点。
• N端序列分析：验证抗体的N端序列正确性。
• C端序列分析：验证抗体的C端序列正确性。
• 糖基化分析：检测抗体糖链结构及修饰情况。
• 二硫键分析：确认抗体中二硫键的正确配对。
• 电荷异质性分析：评估ADC的电荷变异情况。
• 分子量测定：测定ADC的完整分子量。
• 片段分析：检测ADC中是否存在降解片段。
• 纯度分析：评估ADC样品的纯度水平。
• 聚集物分析：检测ADC中是否存在高分子量聚集物。
• 游离药物分析：测定ADC中未连接的小分子药物含量。
• 游离抗体分析：测定ADC中未连接药物的抗体含量。
• 疏水性分析：评估ADC的疏水特性。
• 翻译后修饰分析：检测ADC中的磷酸化、乙酰化等修饰。
• 氧化分析：评估抗体或药物部分的氧化程度。
• 脱酰胺分析：检测天冬酰胺脱酰胺化情况。
• 肽图分析：通过酶解和质谱分析ADC的肽段。
• 糖型分析：鉴定ADC中糖链的具体结构。
• 等电点测定：测定ADC的等电点。
• 稳定性测试：评估ADC在不同条件下的稳定性。
• 效价测定：测定ADC的生物活性。
• 结合活性分析：评估ADC与靶标的结合能力。
• 内毒素检测：测定ADC样品中的内毒素含量。
• 宿主细胞蛋白残留：检测生产过程中残留的宿主细胞蛋白。
• DNA残留分析：测定样品中宿主细胞DNA残留量。
• 微生物限度检测：评估ADC样品的微生物污染情况。
• 无菌测试：确认ADC样品是否无菌。
• 外观检查：评估ADC溶液的澄清度、颜色等物理性状。

检测范围

• 单克隆抗体偶联药物
• 双特异性抗体偶联药物
• 多肽偶联药物
• 纳米抗体偶联药物
• 抗体片段偶联药物
• 放射性同位素偶联药物
• 荧光标记抗体偶联物
• 酶标记抗体偶联物
• 毒素偶联抗体
• 小分子化疗药物偶联抗体
• 免疫刺激剂偶联抗体
• 抗生素偶联抗体
• 多肽毒素偶联抗体
• 聚合物偶联抗体
• 脂质体偶联抗体
• 核酸偶联抗体
• 金属药物偶联抗体
• 前药偶联抗体
• 双药偶联抗体
• 多价偶联抗体
• 靶向递送偶联物
• 细胞穿透肽偶联抗体
• 生物素标记抗体偶联物
• 聚乙二醇化抗体偶联物
• 糖基化修饰抗体偶联物
• 磷酸化修饰抗体偶联物
• 乙酰化修饰抗体偶联物
• 甲基化修饰抗体偶联物
• 硫酸化修饰抗体偶联物
• 泛素化修饰抗体偶联物

检测方法

• 液相色谱-质谱联用（LC-MS）：用于ADC的序列分析和药物负载比测定。
• 毛细管电泳（CE）：分离和检测ADC的电荷异质性和纯度。
• 尺寸排阻色谱（SEC）：分析ADC的聚集物和片段。
• 反相液相色谱（RP-HPLC）：用于肽图分析和疏水性评估。
• 离子交换色谱（IEX）：测定ADC的电荷变异体。
• 酶联免疫吸附试验（ELISA）：检测ADC的结合活性和效价。
• 表面等离子共振（SPR）：实时分析ADC与靶标的结合动力学。
• 圆二色谱（CD）：评估ADC的二级结构。
• 荧光光谱：检测ADC的荧光标记和构象变化。
• 动态光散射（DLS）：测定ADC的粒径分布。
• 静态光散射（SLS）：测定ADC的绝对分子量。
• 差示扫描量热法（DSC）：评估ADC的热稳定性。
• 等电聚焦电泳（IEF）：测定ADC的等电点。
• 肽质量指纹图谱（PMF）：通过质谱鉴定ADC的肽段。
• 串联质谱（MS/MS）：用于ADC的序列确认和修饰分析。
• 糖链释放和标记：分析ADC的糖基化修饰。
• Edman降解：测定ADC的N端序列。
• 还原/非还原SDS-PAGE：评估ADC的完整性和片段。
• Western blot：特异性检测ADC中的目标蛋白。
• 细胞毒性试验：测定ADC对靶细胞的杀伤效果。
• 流式细胞术：分析ADC与细胞的结合情况。
• 内毒素检测（LAL）：测定ADC样品中的内毒素。
• 宿主细胞蛋白ELISA：检测残留宿主细胞蛋白。
• qPCR：定量分析宿主细胞DNA残留。
• 微生物限度测试：评估ADC的微生物污染。

检测仪器

• 液相色谱仪
• 质谱仪
• 毛细管电泳仪
• 紫外可见分光光度计
• 荧光分光光度计
• 圆二色谱仪
• 表面等离子共振仪
• 动态光散射仪
• 静态光散射仪
• 差示扫描量热仪
• 等电聚焦电泳系统
• SDS-PAGE电泳系统
• Western blot系统
• 酶标仪
• 流式细胞仪