重组蛋白CE-SDS检测

信息概要

重组蛋白CE-SDS检测是一种基于毛细管电泳与十二烷基硫酸钠（SDS）结合的分离技术，用于分析重组蛋白的纯度、分子量及片段分布。该检测在生物制药、基因工程及蛋白质研究领域具有重要意义，可确保重组蛋白产品的质量一致性、工艺稳定性及合规性，为研发和生产提供关键数据支持。

检测项目

• 分子量测定：通过迁移时间计算目标蛋白的分子量。
• 纯度分析：评估样品中主成分与杂质的比例。
• 片段分布：检测蛋白降解或翻译后修饰产生的片段。
• 非糖基化蛋白含量：分析未糖基化蛋白的占比。
• 二硫键完整性：验证蛋白中二硫键的正确形成。
• 聚集体检测：识别高分子量聚集体的存在。
• 电荷异质性：评估蛋白因电荷差异导致的变体。
• N端序列一致性：确认蛋白N端序列是否符合预期。
• C端修饰分析：检测C端可能的截断或修饰。
• 氧化变体：识别蛋氨酸或色氨酸氧化产物。
• 脱酰胺化：评估天冬酰胺或谷氨酰胺的脱酰胺化程度。
• 疏水性分析：通过疏水相互作用评估蛋白构象。
• 糖型分布：分析糖蛋白的糖链结构多样性。
• 宿主细胞蛋白残留：检测生产过程中宿主蛋白的残留量。
• 内毒素含量：评估样品中内毒素污染水平。
• 蛋白浓度：测定样品中目标蛋白的绝对含量。
• 等电点测定：确定蛋白的等电点以评估电荷特性。
• 溶解度分析：评估蛋白在溶液中的溶解稳定性。
• 稳定性测试：考察不同条件下蛋白的降解趋势。
• 批间一致性：比较不同生产批次的质量差异。
• 强制降解研究：通过极端条件加速评估蛋白稳定性。
• 翻译后修饰：检测磷酸化、乙酰化等修饰位点。
• 抗体结合活性：验证功能性抗体的抗原结合能力。
• 酶活性测定：评估酶类重组蛋白的催化活性。
• 配体结合分析：检测蛋白与配体的相互作用强度。
• 亚基组成：分析多亚基蛋白的各组分比例。
• 荧光标记效率：评估荧光标记蛋白的标记率。
• 紫外吸收特性：测定蛋白在特定波长下的吸光度。
• 剪切变体：识别蛋白水解或工艺相关的剪切产物。
• 辅因子结合：分析蛋白与辅因子的结合状态。

检测范围

• 单克隆抗体
• 双特异性抗体
• 融合蛋白
• 细胞因子
• 生长因子
• 酶类重组蛋白
• 疫苗抗原
• 激素蛋白
• 受体蛋白
• 抗体片段（Fab/Fc/scFv）
• 病毒载体包装蛋白
• 诊断用重组蛋白
• 细胞治疗相关蛋白
• 基因编辑工具蛋白
• 血液制品替代蛋白
• 抗菌肽
• 毒素蛋白
• 荧光标记蛋白
• 亲和标签蛋白
• 膜蛋白提取物
• 核糖体蛋白
• 分子伴侣蛋白
• 信号传导蛋白
• 转录调控蛋白
• 结构蛋白
• 胶原蛋白
• 纤维蛋白
• 病毒样颗粒
• 纳米抗体
• ADC药物偶联蛋白

检测方法

• CE-SDS非还原法：在非还原条件下分析蛋白完整结构。
• CE-SDS还原法：通过还原剂打断二硫键检测亚基组成。
• 毛细管等电聚焦：基于等电点分离电荷异质性变体。
• 尺寸排阻色谱：评估高分子量聚集体及片段。
• 反相色谱：分析疏水性蛋白或肽段。
• 质谱联用技术：准确测定分子量及修饰位点。
• ELISA：定量检测特定杂质或活性成分。
• 圆二色谱：评估蛋白二级结构完整性。
• 动态光散射：测定蛋白粒径分布及聚集状态。
• 静态光散射：绝对分子量测定。
• 差示扫描量热法：分析蛋白热稳定性。
• 荧光光谱：检测蛋白构象变化或标记效率。
• Western Blot：特异性验证目标蛋白存在。
• 肽图分析：酶解后LC-MS/MS鉴定序列覆盖度。
• 糖链分析：通过HPLC或质谱解析糖基化修饰。
• Edman降解：N端序列测定。
• 氨基酸组成分析：水解后定量氨基酸比例。
• 紫外可见光谱：测定蛋白浓度及纯度指标。
• 生物层干涉：实时监测分子相互作用动力学。
• 表面等离子共振：定量分析结合亲和力。
• 微流控芯片电泳：快速高通量筛查蛋白变体。
• 离子交换色谱：分离电荷变异体。
• 疏水相互作用色谱：评估表面疏水性差异。
• 非变性电泳：保持天然构象的状态下分离蛋白。
• 交叉免疫电泳：检测抗原抗体复合物形成。

检测仪器

• 毛细管电泳仪
• 液相色谱仪
• 质谱仪
• 紫外分光光度计
• 荧光分光光度计
• 圆二色谱仪
• 动态光散射仪
• 静态光散射仪
• 差示扫描量热仪
• 生物分析仪
• 表面等离子共振仪
• 微流控芯片分析系统
• 凝胶成像系统
• 电泳电源系统
• 自动馏分收集器