蛋白质样品N端氨基酸序列测试

信息概要

蛋白质样品N端氨基酸序列测试是一种通过测定蛋白质N端氨基酸序列来鉴定蛋白质结构和功能的关键技术。该检测广泛应用于生物制药、疾病研究、食品科学等领域，对于确保蛋白质产品的质量、纯度和一致性至关重要。通过准确的N端序列分析，可以验证蛋白质的翻译后修饰、降解情况以及潜在的结构异常，为科研和工业生产提供可靠的数据支持。

检测项目

• N端氨基酸序列测定：确定蛋白质N端起始氨基酸序列
• 序列覆盖率分析：评估测序结果覆盖的蛋白质序列范围
• 信号肽检测：识别可能存在的信号肽序列
• 翻译后修饰鉴定：检测N端乙酰化等修饰
• 序列一致性验证：与理论序列进行比对验证
• 截短形式检测：识别可能的N端截短变异体
• 二硫键定位：辅助确定二硫键位置信息
• 序列异质性分析：检测样品中序列变异情况
• N端封闭检测：识别N端封闭的蛋白质
• 降解产物分析：评估蛋白质降解程度
• 突变体筛查：检测N端区域的点突变
• 多序列比对：与相关蛋白质序列进行比对
• 分子量验证：与质谱数据协同验证
• 纯度评估：通过序列分析评估样品纯度
• 批次间一致性：比较不同批次产品的序列
• 表达系统验证：确认表达系统的准确性
• 序列数据库比对：与公共数据库进行比对
• 结构域确认：验证重要功能结构域的存在
• 融合蛋白验证：确认融合蛋白的连接序列
• 糖基化位点预测：预测可能的糖基化位点
• 磷酸化检测：识别磷酸化修饰位点
• 氧化修饰分析：检测甲硫氨酸氧化等修饰
• 蛋白水解加工：分析前体蛋白的加工位点
• 同源性分析：评估与已知蛋白的同源性
• 免疫原性预测：预测可能的免疫原性序列
• 稳定性指示：作为蛋白质稳定性的指标
• 工艺相关变异：检测工艺引入的序列变异
• 种属鉴定：通过序列确定蛋白质来源
• 变构效应分析：评估序列变异对构象的影响
• 功能相关性：将序列特征与功能相关联

检测范围

• 重组治疗性蛋白
• 单克隆抗体
• 融合蛋白
• 疫苗抗原
• 酶制剂
• 细胞因子
• 生长因子
• 激素蛋白
• 血液制品
• 诊断用蛋白
• 研究用重组蛋白
• 工业用酶
• 食品蛋白
• 饲料蛋白
• 化妆品蛋白
• 病毒载体蛋白
• 膜蛋白
• 核蛋白
• 分泌蛋白
• 胞质蛋白
• 细胞器蛋白
• 结构蛋白
• 转运蛋白
• 受体蛋白
• 通道蛋白
• 伴侣蛋白
• 抗体片段
• 多肽药物
• 毒素蛋白
• 抗菌肽

检测方法

• Edman降解法：经典的N端序列测定方法
• 质谱法：高灵敏度的序列分析方法
• MALDI-TOF MS：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
• ESI-MS：电喷雾电离质谱
• LC-MS/MS：液相色谱串联质谱
• 毛细管电泳：高分辨分离技术
• HPLC：液相色谱分析
• RP-HPLC：反相液相色谱
• 离子交换色谱：基于电荷的分离方法
• 凝胶电泳：初步分离和评估
• Western blotting：特异性检测方法
• 氨基酸组成分析：辅助序列确认
• 肽图分析：酶解后的肽段分析
• 二硫键定位：还原与非还原条件比较
• N端封闭分析：特殊化学处理方法
• 同位素标记：提高检测灵敏度
• 荧光标记：增强检测信号
• 生物信息学分析：序列比对和预测
• 圆二色谱：辅助结构分析
• 红外光谱：辅助结构鉴定
• 核磁共振：高分辨率结构分析
• 表面等离子体共振：相互作用分析
• 差示扫描量热法：稳定性评估
• 动态光散射：聚集状态分析
• 尺寸排阻色谱：分子大小分析

检测仪器

• 蛋白质测序仪
• 质谱仪
• MALDI-TOF质谱仪
• ESI质谱仪
• LC-MS/MS系统
• 液相色谱仪
• 毛细管电泳仪
• 凝胶电泳系统
• Western blotting系统
• 氨基酸分析仪
• 圆二色谱仪
• 红外光谱仪
• 核磁共振仪
• 表面等离子体共振仪
• 动态光散射仪