单克隆抗体全长序列检测

信息概要

单克隆抗体全长序列检测是一项关键的生物技术检测服务，旨在通过高通量测序和生物信息学分析，全面解析抗体的可变区、恒定区及全长序列信息。该检测对于抗体药物的研发、质量控制、专利保护及临床前研究具有重要意义，可确保抗体的结构完整性、功能特异性和批次间一致性。

第三方检测机构提供、合规的单克隆抗体序列检测服务，覆盖从基因到蛋白的全流程分析，帮助客户精准验证抗体序列的准确性，规避研发风险，加速药物申报进程。

检测项目

• 可变区序列分析：测定抗体重链和轻链的可变区核苷酸及氨基酸序列
• 恒定区序列验证：确认抗体恒定区的结构完整性
• CDR区定位：识别互补决定区的准确位置和序列特征
• 信号肽检测：分析前导序列的存在与否及正确性
• 全长序列组装：整合可变区与恒定区生成完整抗体序列
• 翻译后修饰位点：预测糖基化、磷酸化等潜在修饰位点
• 序列一致性比对：与参考序列进行全局比对验证
• 种属来源分析：通过序列特征判断抗体原始种属
• 亚型鉴定：确定IgG1/IgG2等抗体亚型类别
• 突变筛查：检测非预期氨基酸替换或缺失
• 移码突变分析：验证阅读框的连续性
• 终止密码子检测：确保无提前终止现象
• 二硫键预测：分析分子内二硫键的形成能力
• 可变区种系溯源：追踪V(D)J基因片段来源
• 序列专利性评估：提供专利侵权风险分析
• 序列唯一性验证：确认无交叉污染或混合序列
• 表达载体匹配：验证与载体设计序列的一致性
• 密码子优化评估：分析宿主细胞适配性
• 可变区疏水性分析：评估CDR区的溶解特性
• 可变区电荷分布：分析表面电荷对稳定性的影响
• 可变区结构预测：通过建模评估三维构象
• 可变区稳定性预测：计算热力学稳定性参数
• 可变区免疫原性预测：评估潜在的人抗药抗体反应
• 可变区亲和力预测：通过算法估算抗原结合能力
• 可变区特异性分析：确认靶标结合的特异性
• 可变区多样性分析：评估体细胞高频突变水平
• 可变区克隆性验证：确认单克隆来源
• 可变区框架区分析：评估FR区的保守性
• 可变区CDR长度：测量各CDR区的氨基酸数量
• 可变区突变热点：识别高频突变位点

检测范围

• 人源化单克隆抗体
• 嵌合单克隆抗体
• 全人源单克隆抗体
• 鼠源单克隆抗体
• 兔源单克隆抗体
• 羊源单克隆抗体
• 鸡源单克隆抗体
• 骆驼源单克隆抗体
• 鲨鱼源单克隆抗体
• IgG类单克隆抗体
• IgM类单克隆抗体
• IgA类单克隆抗体
• IgE类单克隆抗体
• IgD类单克隆抗体
• 双特异性抗体
• 抗体药物偶联物(ADC)
• Fc融合蛋白
• 单链抗体(scFv)
• Fab片段
• F(ab')2片段
• 纳米抗体
• 双价抗体
• 三价抗体
• 四价抗体
• pH依赖性抗体
• 糖工程化抗体
• 聚乙二醇化抗体
• 放射性标记抗体
• 荧光标记抗体
• 酶标抗体

检测方法

• Sanger测序：采用双脱氧终止法进行高精度序列测定
• 二代测序(NGS)：通过高通量平台获取深度序列信息
• 三代测序：利用长读长技术解决复杂区域测序难题
• RT-PCR：从mRNA反转录获取编码序列
• 5'RACE：鉴定抗体可变区5'端完整序列
• 3'RACE：确定抗体可变区3'端序列
• 巢式PCR：提高低丰度序列的检出灵敏度
• 数字PCR：绝对定量特定序列的拷贝数
• 质谱测序：通过质谱技术解析抗体氨基酸序列
• Edman降解：N端氨基酸序列的直接测定
• 肽图分析：通过酶解和LC-MS/MS确定局部序列
• Western Blot：验证抗体大小和完整性
• ELISA：定量检测抗体表达水平
• 毛细管电泳：分析抗体片段大小分布
• 质谱分子量测定：准确测量完整分子量
• 糖基化分析：鉴定N/O连接糖基化位点
• 二硫键定位：通过还原/非还原条件分析二硫键
• 圆二色谱：评估二级结构特征
• 动态光散射：检测抗体聚集状态
• 表面等离子共振：分析抗原结合动力学
• 等电聚焦：测定抗体电荷异质性
• 差示扫描量热法：评估热稳定性
• 尺寸排阻色谱：分析高分子量物质含量
• 离子交换色谱：检测电荷变异体
• 疏水相互作用色谱：评估表面疏水性

检测仪器

• ABI 3730xl DNA测序仪
• Illumina NovaSeq 6000
• PacBio Sequel II
• Nanopore GridION
• Q Exactive HF质谱仪
• TripleTOF 6600质谱仪
• Agilent 2100生物分析仪
• Bio-Rad CFX96实时PCR仪
• Applied Biosystems QuantStudio
• Beckman Coulter PA 800
• Malvern Zetasizer Nano
• Waters ACQUITY UPLC
• Agilent 1260 Infinity HPLC
• GE Healthcare Biacore T200
• PerkinElmer Victor X4