重组蛋白SEC-HPLC纯度检测

信息概要

重组蛋白SEC-HPLC纯度检测是一种通过液相色谱（HPLC）技术结合尺寸排阻色谱（SEC）原理，对重组蛋白样品进行纯度分析的重要方法。该检测能够准确评估重组蛋白的聚合体、降解产物以及其他杂质的存在情况，确保蛋白产品的质量和稳定性。在生物制药、疫苗研发以及生物技术领域，纯度检测是质量控制的关键环节，直接影响产品的安全性和有效性。

检测项目

• 单体含量：测定重组蛋白中单体形式的比例，反映样品的主要成分。
• 聚合体含量：检测高分子量聚合体的存在，评估蛋白的稳定性。
• 降解产物：分析蛋白降解产生的片段或其他杂质。
• 保留时间：确定蛋白在色谱柱中的保留时间，用于定性分析。
• 峰面积：通过峰面积计算各组分的相对含量。
• 峰对称性：评估色谱峰的对称性，反映分离效果。
• 柱效：测定色谱柱的分离效率。
• 分辨率：评估不同组分之间的分离程度。
• 拖尾因子：分析色谱峰的拖尾情况，判断分离效果。
• 理论塔板数：计算色谱柱的理论塔板数，评估柱效。
• 样品回收率：测定样品在分析过程中的回收率。
• 线性范围：确定检测方法的线性响应范围。
• 检测限：评估方法的最低检测限。
• 定量限：确定方法的定量检测下限。
• 重复性：分析同一样品多次检测的结果一致性。
• 中间精密度：评估不同条件下检测结果的可重复性。
• 特异性：确认方法对目标蛋白的选择性。
• 稳定性：分析样品在检测过程中的稳定性。
• 缓冲液兼容性：评估不同缓冲液对检测结果的影响。
• 流速影响：分析流速变化对分离效果的影响。
• 温度影响：评估温度变化对色谱行为的影响。
• pH影响：分析pH值对蛋白保留行为的影响。
• 盐浓度影响：评估盐浓度对分离效果的影响。
• 样品浓度影响：分析样品浓度对检测结果的影响。
• 柱寿命：评估色谱柱的使用寿命。
• 系统适应性：确认检测系统的整体性能。
• 基线噪声：分析基线的噪声水平。
• 基线漂移：评估基线的稳定性。
• 梯度洗脱效果：分析梯度洗脱对分离的影响。
• 等度洗脱效果：评估等度洗脱条件下的分离效果。

检测范围

• 单克隆抗体
• 融合蛋白
• 细胞因子
• 生长因子
• 酶类蛋白
• 疫苗抗原
• 重组激素
• 抗体片段
• 病毒样颗粒
• 基因治疗载体
• 血液制品
• 诊断试剂蛋白
• 受体蛋白
• 信号蛋白
• 转录因子
• 膜蛋白
• 核蛋白
• 分泌蛋白
• 胞内蛋白
• 糖蛋白
• 脂蛋白
• 磷酸化蛋白
• 泛素化蛋白
• 乙酰化蛋白
• 甲基化蛋白
• 多肽药物
• 蛋白偶联物
• 纳米抗体
• 双特异性抗体
• 抗体药物偶联物

检测方法

• 尺寸排阻色谱法（SEC-HPLC）：基于分子大小差异分离蛋白。
• 反相液相色谱法（RP-HPLC）：利用疏水性差异分离蛋白。
• 离子交换色谱法（IEX-HPLC）：基于电荷差异分离蛋白。
• 疏水相互作用色谱法（HIC）：利用疏水作用分离蛋白。
• 亲和色谱法：通过特异性结合分离目标蛋白。
• 多角度光散射法（MALS）：测定蛋白的绝对分子量。
• 动态光散射法（DLS）：分析蛋白的流体力学半径。
• 静态光散射法（SLS）：测定蛋白的分子量和聚集状态。
• 圆二色谱法（CD）：分析蛋白的二级结构。
• 荧光光谱法：检测蛋白的荧光特性。
• 紫外-可见光谱法：测定蛋白的紫外吸收特性。
• 质谱法（MS）：准确测定蛋白的分子量和序列。
• 电泳法（SDS-PAGE）：基于分子量分离蛋白。
• 毛细管电泳法（CE）：分离蛋白和杂质。
• 等电聚焦电泳法（IEF）：基于等电点分离蛋白。
• Western blot：特异性检测目标蛋白。
• ELISA：定量检测蛋白含量。
• 生物活性测定：评估蛋白的功能活性。
• 肽图分析：通过酶解和色谱分析蛋白序列。
• N-端测序：测定蛋白的N-端氨基酸序列。
• C-端测序：测定蛋白的C-端氨基酸序列。
• 糖基化分析：检测蛋白的糖基化修饰。
• 二硫键分析：测定蛋白中的二硫键结构。
• 聚集态分析：评估蛋白的聚集状态。
• 稳定性指示方法：分析蛋白在不同条件下的稳定性。

检测仪器

• 液相色谱仪（HPLC）
• 超液相色谱仪（UPLC）
• 多角度光散射检测器（MALS）
• 动态光散射仪（DLS）
• 静态光散射仪（SLS）
• 圆二色谱仪（CD）
• 荧光光谱仪
• 紫外-可见分光光度计
• 质谱仪（MS）
• 电泳系统
• 毛细管电泳仪（CE）
• 等电聚焦电泳仪（IEF）
• Western blot系统
• ELISA读板机
• 生物反应器