数字PCR检测

信息概要

数字PCR（Digital PCR，dPCR）是一种高灵敏度、高特异性的核酸绝对定量技术，通过将样本分割成数千至数百万个微反应单元，实现对目标核酸分子的精准计数。该技术无需依赖标准曲线，可直接计算拷贝数，在肿瘤标志物检测、病原微生物定量、基因表达分析等领域具有重要应用价值。

数字PCR检测的重要性在于其能够突破传统qPCR的局限性，尤其适用于低丰度靶标检测、复杂背景下的稀有突变分析以及微小拷贝数变异鉴定。第三方检测机构通过化的数字PCR服务平台，为科研、临床及工业客户提供标准化、可追溯的检测解决方案。

检测项目

• 绝对核酸定量：准确计算DNA/RNA模板的起始拷贝数
• 稀有突变检测：识别低至0.1%频率的体细胞突变
• 拷贝数变异分析：检测基因组拷贝数的细微变化
• microRNA表达谱：定量微小RNA的表达差异
• 病毒载量检测：实现病原体的绝对定量分析
• 转基因成分检测：精准鉴定转基因生物成分
• 单细胞基因表达：分析单个细胞的mRNA表达水平
• 甲基化水平检测：定量特定CpG位点的甲基化程度
• 基因编辑效率评估：准确计算CRISPR编辑效率
• 融合基因检测：识别染色体易位产生的融合转录本
• 循环肿瘤DNA：监测血液中痕量肿瘤DNA
• SNP分型：进行单核苷酸多态性分析
• 等位基因不平衡：检测等位基因表达差异
• 基因剂量测定：确定特定基因的拷贝数
• 质粒拷贝数：定量细菌中质粒的拷贝数量
• 微生物组定量：准确分析微生物群落组成
• 疫苗效价测定：评估疫苗中核酸成分的含量
• 基因治疗载体定量：检测AAV等载体的基因组滴度
• NGS文库定量：准确测定测序文库的分子浓度
• 外泌体RNA检测：分析外泌体携带的核酸标志物
• 环境DNA监测：检测环境样本中的微量生物DNA
• 食品安全检测：定量食品中的过敏原或污染物
• 药物代谢基因：评估药物代谢相关基因表达
• 移植排斥监测：检测供体来源的cfDNA
• 产前诊断：分析母血中胎儿DNA异常
• 细菌耐药基因：定量耐药基因的表达水平
• 基因沉默效率：评估siRNA/shRNA的敲除效果
• 转录因子结合：通过DNA免疫沉淀定量靶序列
• 端粒长度测定：间接评估端粒重复序列数量
• 基因重组验证：检测基因重组事件的效率

检测范围

• 肿瘤基因突变检测
• 遗传病相关变异
• 传染病病原体
• 基因治疗产品
• 疫苗开发质控
• 转基因生物
• 法医物证鉴定
• 环境微生物监测
• 食品安全检测
• 药物基因组学
• 表观遗传修饰
• 单细胞分析
• 干细胞研究
• 免疫治疗监测
• 移植排斥诊断
• 产前筛查诊断
• 微生物耐药性
• 合成生物学
• 基因编辑验证
• 生物标志物发现
• 代谢通路分析
• 衰老相关研究
• 神经退行性疾病
• 心血管疾病风险
• 自身免疫疾病
• 感染性疾病
• 罕见病诊断
• 精准用药指导
• 生物制剂质控
• 环境DNA溯源

检测方法

• 微滴式数字PCR：通过油包水乳化技术生成纳升级微滴
• 芯片式数字PCR：在微流控芯片上实现样本分区
• 微孔板数字PCR：利用高密度微孔阵列进行反应分区
• 多重数字PCR：同时检测多个靶标的高通量方法
• 逆转录数字PCR：用于RNA模板的绝对定量
• 甲基化特异性dPCR：定量分析DNA甲基化水平
• 微流控数字PCR：集成微流控技术的自动化检测
• 高分辨率熔解曲线：结合dPCR的突变扫描技术
• 液滴生成技术：精密控制微滴大小均一性
• 液滴读取技术：荧光信号的高灵敏度检测
• 微滴分选技术：对阳性微滴进行物理分离
• 数字PCR芯片技术：硅基或聚合物基微反应腔阵列
• 数字PCR微球技术：使用编码微球作为反应载体
• 数字PCR条形码：多重检测的分子标签技术
• 数字PCR绝对计数：基于泊松分布的拷贝数计算
• 数字PCR相对定量：内参基因校正的表达分析
• 数字PCR突变富集：选择性扩增稀有突变
• 数字PCR单分子检测：单个核酸分子的捕获与扩增
• 数字PCR微滴校准：使用参考标准品进行质控
• 数字PCR数据分析：软件进行阈值设定与结果判读
• 数字PCR验证方法：与传统qPCR的结果比对
• 数字PCR灵敏度测试：检测限与定量限的确定
• 数字PCR特异性验证：引物探针的特异性评估
• 数字PCR重复性测试：批内批间精密度分析
• 数字PCR线性范围：动态范围的确定与验证

检测仪器

• QX200微滴式数字PCR系统
• QuantStudio 3D数字PCR系统
• Naica微滴式数字PCR系统
• Bio-Rad ddPCR系统
• RainDrop数字PCR系统
• Stilla数字PCR系统
• Thermo Fisher QuantStudio Absolute Q系统
• JN MedSys Clarity数字PCR系统
• Elitech数字PCR系统
• Sansure数字PCR系统
• Thermo Fisher QuantStudio 5
• Bio-Rad QX600
• Qiagen QIAcuity
• Stilla Crystal数字PCR仪
• Thermo Fisher QuantStudio 6