蛋白质样品C端羧肽酶法测序实验

信息概要

蛋白质样品C端羧肽酶法测序实验是一种通过羧肽酶逐步切割蛋白质C端氨基酸，结合液相色谱（HPLC）或质谱（MS）技术，测定蛋白质C端序列的分析方法。该检测服务广泛应用于生物制药、蛋白质工程及基础研究领域，对于验证蛋白质结构、评估翻译后修饰（如羧基末端修饰）以及确保产品质量具有重要意义。

通过第三方检测机构的服务，客户可获得高精度、可重复的C端序列数据，为研发、生产及质量控制提供关键依据。

检测项目

• C端氨基酸序列测定：确定蛋白质C端1-10个氨基酸的排列顺序
• C端均一性分析：评估样品中C端序列的一致性
• 末端修饰检测：鉴定羧基末端的乙酰化、酰胺化等修饰
• 游离羧基含量：测定未修饰C端羧基的比例
• 酶切效率验证：评估羧肽酶对目标蛋白的水解效率
• 降解产物分析：检测可能存在的C端降解片段
• 分子量验证：通过质谱确认C端序列的分子量匹配
• 突变体筛查：识别C端非预期氨基酸替换
• 截短变体检测：发现可能存在的C端截短形式
• 二硫键定位：辅助确定近C端的二硫键位置
• 糖基化位点：检测C端附近的糖基化修饰
• 磷酸化分析：鉴定C端区域的磷酸化修饰
• 乙酰化程度：定量C端赖氨酸乙酰化水平
• 酰胺化率：测定C端酰胺化修饰的比例
• 氧化损伤评估：检测C端甲硫氨酸等氨基酸的氧化
• 脱酰胺化分析：评估天冬酰胺的脱酰胺化程度
• 异构体区分：鉴定C端氨基酸的D/L异构体
• 聚合体检测：发现C端介导的蛋白质聚合
• 疏水性分析：评估C端序列的疏水特性
• 电荷分布：测定C端区域的净电荷状态
• 酶稳定性：评估C端对蛋白酶的敏感性
• 翻译后修饰图谱：建立C端修饰的全面特征
• 批次一致性：比较不同生产批次的C端特征
• 强制降解研究：在应激条件下C端稳定性评估
• 物种特异性：鉴别不同来源蛋白质的C端差异
• 重组蛋白验证：确认重组蛋白的C端正确性
• 抗体CDR区分析：测定抗体互补决定区的C端特征
• 融合蛋白连接处：验证融合蛋白连接区域的完整性
• 蛋白药物稳定性：监测储存过程中C端的变化
• 工艺相关性：评估纯化工艺对C端特征的影响

检测范围

• 重组治疗性蛋白
• 单克隆抗体
• 双特异性抗体
• 抗体药物偶联物
• 融合蛋白
• 疫苗抗原
• 细胞因子
• 生长因子
• 激素蛋白
• 酶类药物
• 血浆蛋白
• 肽类药物
• 诊断用蛋白
• 研究用重组蛋白
• 工业用酶
• 食品蛋白
• 化妆品蛋白
• 病毒载体蛋白
• 膜蛋白
• 核蛋白
• 分泌蛋白
• 胞内蛋白
• 古菌蛋白
• 植物蛋白
• 动物蛋白
• 微生物蛋白
• 人工合成蛋白
• 修饰蛋白
• 标记蛋白
• 突变体蛋白

检测方法

• 羧肽酶Y酶解法：使用羧肽酶Y进行时间依赖性C端切割
• 羧肽酶P酶解法：针对特定氨基酸的C端水解方法
• 羧肽酶B酶解法：精氨酸/赖氨酸特异性的C端测序
• 液相色谱-质谱联用(LC-MS)：分离并鉴定酶解产物
• MALDI-TOF质谱：快速测定C端肽段质量
• 电喷雾质谱(ESI-MS)：高精度测定C端片段
• 串联质谱(MS/MS)：C端肽段的序列验证
• 反相液相色谱(RP-HPLC)：分离C端降解产物
• 离子交换色谱：基于电荷差异分离C端变体
• 尺寸排阻色谱：评估C端介导的聚合状态
• 毛细管电泳：高分辨率分离C端片段
• Edman降解法：辅助验证近C端序列
• 同位素标记法：定量不同C端形式的比例
• 荧光标记检测：高灵敏度C端分析
• 圆二色谱：评估C端结构变化
• 红外光谱：检测C端修饰特征
• 核磁共振：高分辨率C端结构分析
• 表面等离子体共振：C端结合特性评估
• 酶联免疫吸附试验：特异性C端表位检测
• Western blotting：C端特异性抗体验证
• 差示扫描量热法：评估C端热稳定性
• 动态光散射：检测C端介导的聚集
• 等电聚焦：测定C端修饰引起的pI变化
• 肽图分析：全面表征C端肽段
• 氨基酸组成分析：验证C端氨基酸含量

检测仪器

• 液相色谱仪(HPLC)
• 超液相色谱仪(UPLC)
• 基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)
• 电喷雾四极杆飞行时间质谱(Q-TOF MS)
• 三重四极杆质谱仪
• 轨道阱高分辨质谱(Orbitrap MS)
• 傅里叶变换离子回旋共振质谱(FT-ICR MS)
• 毛细管电泳仪
• 圆二色谱仪
• 红外光谱仪
• 核磁共振波谱仪
• 表面等离子体共振仪
• 酶标仪
• Western blotting系统
• 差示扫描量热仪