色氨酸合酶检测
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检测项目
1. 酶活性测定:单位时间内催化L-丝氨酸与吲哚生成色氨酸的摩尔数(U/mg)
2. 比活性计算:单位蛋白质量对应的酶活性(μmol/min·mg)
3. 最适反应温度:测定范围20-60℃,精度±0.5℃
4. 最适pH值:测定范围5.0-9.0,间隔梯度0.2
5. 米氏常数(Km):针对L-丝氨酸和吲哚双底物体系测定
6. 最大反应速率(Vmax):紫外分光光度法测定340nm吸光度变化
7. 热稳定性:37℃温育0-120分钟残留活性测定
8. 储存稳定性:-80℃保存30天活性保留率
9. 金属离子影响:Ca²⁺/Mg²⁺/Zn²⁺浓度梯度0-10mM
10. 抑制剂敏感性:邻氨基苯甲酸浓度梯度0-5mM
11. 产物抑制效应:色氨酸浓度0-50mM对反应速率影响
12. 亚基结合强度:α与β亚基解离常数(Kd)测定
13. 荧光光谱分析:激发波长295nm/发射波长340nm扫描
14. 圆二色性分析:190-260nm波长扫描测定二级结构变化
15. SDS-PAGE纯度检测:12%分离胶电泳分析亚基组成
检测范围
1. 大肠杆菌重组表达系统提取物
2. 枯草芽孢杆菌发酵液粗酶制剂
3. 哺乳动物细胞培养上清液
4. 植物组织匀浆液(拟南芥叶片/玉米胚乳)
5. 基因工程改造菌株突变体酶液
6. 药用级色氨酸合成原料中间体
7. 食品添加剂生产用固定化酶制剂
8. 临床诊断试剂盒配套酶标准品
9. 工业废水处理用工程菌裂解液
10. 转基因作物种子提取物
11. 动物肝脏微粒体组分
12. 海洋微生物发酵产物
13. 药用真菌次级代谢产物
14. 体外诊断试剂反应体系优化样品
15. 生物反应器连续培养取样液
检测方法
ISO 20633:2018《生物技术-重组蛋白酶活性测定通用要求》
ASTM E2694-21《酶活性测定的标准试验方法》
GB/T 34799-2017《蛋白酶制剂酶活力测定通用方法》
GB 5009.254-2016《食品中色氨酸的测定》附录B酶法分析
JP XVII〈生薬試験法〉酵素活性測定法通則
USP〈1043〉生物技术衍生产品分析方法验证
AOAC Official Method 2012.13《饲料添加剂中色氨酸合酶活性测定》
检测设备
Thermo Scientific Multiskan SkyHigh全波长酶标仪:波长范围200-1000nm,支持动力学模式连续监测
Agilent 1260 Infinity II HPLC:配备DAD检测器用于底物/产物定量分析
Malvern Zetasizer Nano ZSP:动态光散射仪测定酶分子聚集状态
Cytation5细胞成像多功能微孔板检测系统:整合荧光与吸光度双重检测模块
Beckman Coulter ProteomeLab XL-I分析型超速离心机:亚基结合力准确测定
JASCO J-1500圆二色光谱仪:190-260nm波长扫描步长0.1nm
Sartorius Cubis II微量天平:称量精度0.0001g用于标准品配制
Eppendorf Mastercycler X50梯度PCR仪:突变体基因扩增验证实验支持设备
中析研究所检测,科学公正准确!
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
了解中析
实验室仪器
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