核酸甲基转移酶检测

检测项目

1. 酶活性测定：0.1-100 U/mg蛋白（分光光度法）

2. 底物特异性分析：Km值测定（0.05-5 mM）

3. 最适pH范围：6.0-8.5（缓冲体系验证）

4. 温度稳定性：4-37℃保存活性保留率≥90%

5. 金属离子依赖性：Mg²⁺/Zn²⁺浓度梯度0.1-10 mM

6. 抑制剂IC50测定：0.01-100 μM浓度梯度

7. 甲基化位点特异性：CpG/非CpG位点占比分析

8. 反应动力学参数：kcat值（0.1-50 s⁻¹）

9. 产物抑制效应：SAM/SAH浓度梯度0.1-5 mM

10. 热稳定性分析：Tm值测定（差示扫描量热法）

11. 储存稳定性：-80℃保存12个月活性衰减≤5%

12. 交叉反应性测试：与DNMT1/DNMT3同工酶对比

13. 荧光标记效率：FAM/Cy5标记率≥95%

14. 核酸结合能力：Kd值测定（10⁻⁹-10⁻⁶ M）

15. 过程性验证：单次甲基化/多次甲基化事件统计

检测范围

1. 人源组织样本（肝/肾/脑组织匀浆液）

2. 肿瘤细胞系培养上清液

3. 重组表达蛋白制剂（E.coli/HEK293表达系统）

4. 血清/血浆游离DNA复合物

5. DNA甲基化诊断试剂盒核心组分

6. 表观遗传调控药物原料药

7. 基因编辑工具酶复合体

8. 胎盘组织冻干粉提取物

9. 微生物基因组DNA提取物

10. 植物愈伤组织裂解液

11. 法医样本微量DNA浓缩液

12. 干细胞诱导分化中间产物

13. 病毒载体包装系统组分

14. DNA疫苗原液中间体

15. 古生物化石DNA修复产物

检测方法

ISO 17025:2017《检测和校准实验室能力通用要求》

ISO 10993-18:2020《生物样品中核酸修饰分析》

ASTM E2935-17《体外酶活性测定标准指南》

GB/T 30988-2014《生物制品中DNA甲基化分析方法》

GB/T 35823-2018《分子生物学检测用试剂盒通用要求》

YY/T 1596-2017《人类基因甲基化检测试剂盒》行业标准

EP7.0《欧洲药典》核酸类物质活性测定规范

USP<1132>《基因治疗产品残留DNA检测》指导原则

检测设备

Tecan Infinite M200 Pro多功能酶标仪（荧光/吸光度双模式）

Agilent 2100 Bioanalyzer（DNA完整性及片段分布分析）

Thermo Scientific NanoDrop One（微量核酸浓度测定）

Beckman Coulter Optima XPN-80超速离心机（酶复合体分离）

SDS-PAGE电泳系统（Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra）

ABI QuantStudio 5实时荧光定量PCR仪（甲基化特异性扩增）

Covaris M220聚焦超声破碎仪（染色质片段化处理）

Malvern Zetasizer Nano ZSP（酶-DNA复合物动态光散射分析）

中析研究所检测，科学公正准确！

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

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