糖基异构酶相关转移酶检测
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检测项目
1. 酶活性测定:反应时间30-180秒,温度25-37℃,pH 6.8-7.4
2. 比活力计算:单位定义μmol/min/mg蛋白
3. 米氏常数(Km)测定:底物浓度梯度0.1-10 mM
4. 最大反应速率(Vmax):紫外分光法340 nm监测
5. 热稳定性测试:40-80℃梯度温育30分钟
6. pH耐受性分析:缓冲体系pH 5.0-9.0
7. 金属离子影响:Ca²⁺/Mg²⁺/Zn²⁺浓度0.1-5 mM
8. 抑制剂IC50测定:梯度浓度0.01-100 μM
9. 产物特异性验证:HPLC保留时间±0.3分钟
10. 辅因子依赖性:NAD+/NADPH浓度0.05-2 mM
11. 亚基分子量测定:SDS-PAGE误差±1 kDa
12. 二硫键分析:还原/非还原条件对比
13. 糖基化位点鉴定:质谱精度≤5 ppm
14. 储存稳定性:4℃/25℃/-80℃保存30天
15. 交叉反应性测试:10种类似底物验证
检测范围
1. 重组糖基异构酶工程菌株
2. 哺乳动物细胞表达系统产物
3. 体外转录翻译产物
4. 固定化酶制剂
5. 诊断试剂盒核心组分
6. 生物催化反应中间体
7. 药物前体合成体系
8. 食品工业用酶添加剂
9. 环境微生物提取物
10. 古菌来源极端酶
11. CRISPR编辑突变体
12. 定向进化文库筛选产物
13. 药用辅料级酶制剂
14. 生物传感器识别元件
15. 工业发酵上清液
检测方法
ISO 20633-2015《生物催化剂活性测定通用规范》
ASTM E2694-21《酶动力学参数测定标准方法》
GB/T 39515-2020《蛋白质纯度液相色谱法》
ISO 10927-2018《质谱法鉴定蛋白质翻译后修饰》
GB/T 38165-2019《生物制品热稳定性试验规程》
ASTM E2193-23《微量金属离子对酶活性影响测试》
ISO 20658-2021《分子排阻色谱法测定蛋白质聚集》
GB/T 38483-2020《酶抑制剂半数抑制浓度测定法》
检测设备
Cary Eclipse荧光分光光度计(安捷伦G9800A):荧光底物实时监测系统
UltiMate3000液相色谱系统(赛默飞):糖基化产物分离分析模块
Tycho NT.6蛋白稳定性分析仪(Nanotemper):微量样品热变性检测装置
Q Exactive HF-X质谱仪(Thermo Scientific):高分辨率糖基化位点解析系统
SDS-PAGE电泳系统(Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra):亚基分子量验证平台
Cytation5多功能微孔板阅读器(BioTek):高通量酶活筛选项目合作单位
AWS-1000全自动项目合作单位(Hamilton):标准化液体处理系统
SprinterXL全自动电泳仪(Hoefer):快速蛋白纯度分析装置
中析研究所检测,科学公正准确!
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
了解中析
实验室仪器
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