实时荧光定量PCR检测炎症因子mRNA表达

信息概要

实时荧光定量PCR（qPCR）检测炎症因子mRNA表达是一种高灵敏度和特异性的分子生物学技术，用于定量分析细胞或组织中炎症相关基因的mRNA水平。该检测对于研究炎症反应机制、评估疾病状态（如自身免疫疾病、感染和癌症）以及监测治疗效果至关重要。通过检测mRNA表达，可以早期发现炎症标志物，为临床诊断和药物研发提供可靠数据支持。

检测项目

• IL-1β mRNA表达水平
• IL-6 mRNA表达水平
• TNF-α mRNA表达水平
• IL-8 mRNA表达水平
• IL-10 mRNA表达水平
• IL-12 mRNA表达水平
• IL-17 mRNA表达水平
• IL-18 mRNA表达水平
• IFN-γ mRNA表达水平
• TGF-β mRNA表达水平
• MCP-1 mRNA表达水平
• CXCL10 mRNA表达水平
• CCL2 mRNA表达水平
• CCL5 mRNA表达水平
• NF-κB mRNA表达水平
• STAT3 mRNA表达水平
• COX-2 mRNA表达水平
• iNOS mRNA表达水平
• TLR4 mRNA表达水平
• NLRP3 mRNA表达水平
• IL-23 mRNA表达水平
• IL-33 mRNA表达水平
• IL-37 mRNA表达水平
• GM-CSF mRNA表达水平
• VEGF mRNA表达水平
• FGF mRNA表达水平
• PDGF mRNA表达水平
• EGF mRNA表达水平
• Adiponectin mRNA表达水平
• Leptin mRNA表达水平

检测范围

• 外周血单核细胞
• 组织活检样本
• 细胞培养上清液
• 血清样本
• 血浆样本
• 脑脊液样本
• 滑膜液样本
• 尿液样本
• 唾液样本
• 粪便样本
• 肿瘤组织
• 炎症皮肤组织
• 肝脏组织
• 肺部组织
• 心脏组织
• 肾脏组织
• 肠道组织
• 骨髓样本
• 淋巴结样本
• 胎盘组织
• 脂肪组织
• 肌肉组织
• 神经组织
• 眼组织
• 生殖系统组织
• 口腔黏膜
• 呼吸道分泌物
• 伤口渗出液
• 关节液
• 胸腹水样本

检测方法

• SYBR Green法，基于DNA结合染料的荧光检测
• TaqMan探针法，使用序列特异性探针进行定量
• 分子信标法，利用发夹结构探针提高特异性
• 双杂交探针法，通过两个相邻探针增强信号
• 高分辨率熔解曲线分析，用于区分非特异性产物
• 数字PCR法，提供绝对定量结果
• 逆转录实时PCR，结合cDNA合成步骤
• 多重实时PCR，同时检测多个靶标
• 相对定量法，使用内参基因进行标准化
• 绝对定量法，基于标准曲线计算拷贝数
• 基因表达微阵列验证法，辅助qPCR数据
• RNA测序比对法，确认mRNA序列
• 内源性对照法，确保RNA质量
• 外源性对照法，监控实验过程
• 熔解曲线分析，评估扩增特异性
• 标准曲线法，用于定量校准
• 阈值循环法，基于Ct值计算表达量
• 实时荧光监测法，跟踪扩增过程
• 样品预处理法，优化RNA提取
• 数据分析软件法，自动化处理结果

检测仪器

• 实时荧光定量PCR仪
• 微量分光光度计
• 核酸提取仪
• 离心机
• 恒温水浴锅
• 电泳仪
• 凝胶成像系统
• 超低温冰箱
• 生物安全柜
• 微量加样器
• 振荡器
• pH计
• 分析天平
• 紫外可见分光光度计
• 数据处理项目合作单位

实时荧光定量PCR检测炎症因子mRNA表达的常见问题包括：如何确保RNA样本的质量？建议使用RNA完整性指数评估和避免降解。该检测在临床中的应用有哪些？主要用于炎症疾病诊断和药物疗效监测。如何选择内参基因？应选择表达稳定的看家基因如GAPDH或β-actin。