细胞旁路转运评估测试

信息概要

细胞旁路转运评估测试是一种重要的体外细胞模型研究方法，主要用于评估药物、营养物质或其他化合物通过细胞旁路途径（即穿过细胞间紧密连接）的转运能力。该测试通常使用Caco-2细胞模型或MDCK细胞模型等，模拟肠道、血脑屏障或其他上皮组织的旁路渗透性。检测的重要性在于，它有助于预测化合物的口服生物利用度、毒性风险以及药物开发中的跨膜转运特性，对于药物筛选、食品安全评估和毒理学研究具有关键作用。

检测项目

• 表观渗透系数测定
• 跨上皮电阻测量
• 旁路转运通量分析
• 紧密连接完整性评估
• 细胞单层通透性测试
• 旁路转运速率计算
• 转运抑制剂影响评估
• 细胞活力检测
• 旁路转运途径验证
• 转运时间依赖性研究
• 浓度梯度影响分析
• pH依赖性转运测试
• 温度依赖性转运测试
• 转运饱和性评估
• 旁路转运选择性测定
• 细胞间通透性成像
• 转运代谢稳定性测试
• 旁路转运回收率计算
• 转运方向性分析
• 转运效率评估
• 细胞旁路转运机制研究
• 转运蛋白表达水平检测
• 旁路转运抑制实验
• 转运协同效应测试
• 转运竞争性抑制分析
• 细胞模型验证测试
• 旁路转运重复性评估
• 转运线性范围测定
• 旁路转运检测限测量
• 转运定量限评估

检测范围

• Caco-2细胞模型
• MDCK细胞模型
• HT29细胞模型
• TC7细胞亚系
• 肠道上皮细胞模型
• 血脑屏障细胞模型
• 肾小管上皮细胞模型
• 肺泡上皮细胞模型
• 角膜上皮细胞模型
• 皮肤角质形成细胞模型
• 胎盘屏障细胞模型
• 肝细胞旁路转运模型
• 肿瘤细胞旁路转运模型
• 原代上皮细胞模型
• 三维细胞培养模型
• 微流控芯片细胞模型
• 高通量筛选细胞模型
• 基因编辑细胞模型
• 干细胞衍生上皮模型
• 共培养细胞模型
• 炎症状态细胞模型
• 老化细胞模型
• 病理状态细胞模型
• 药物诱导细胞模型
• 环境应激细胞模型
• 转基因动物源细胞模型
• 人体组织来源细胞模型
• 微生物共培养模型
• 纳米材料转运模型
• 生物大分子转运模型

检测方法

• Transwell扩散法：使用Transwell小室测定化合物跨细胞单层的转运
• TEER测量法：通过电生理仪器测量跨上皮电阻评估紧密连接完整性
• 荧光示踪法：利用荧光标记物可视化旁路转运过程
• LC-MS/MS法：通过液相色谱-质谱联用定量分析转运化合物
• 细胞活力MTT法：使用MTT试剂评估细胞活性对转运的影响
• 免疫荧光染色法：检测紧密连接蛋白表达以验证旁路途径
• Western blot法：分析转运相关蛋白的表达水平
• 实时细胞分析技术：连续监测细胞旁路转运动态
• 微透析法：在体外模型中采样分析旁路转运物
• 细胞通透性计算法：基于数学模型计算表观渗透系数
• 抑制剂共孵育法：使用旁路转运抑制剂研究机制
• pH梯度法：模拟不同pH条件评估转运变化
• 温度控制法：在不同温度下测试转运速率
• 转运饱和实验法：通过浓度梯度研究转运饱和性
• 双向转运法：比较顶端到底端和底端到顶端的转运差异
• 细胞成像法：利用显微镜观察细胞间通透性
• 基因沉默法：通过RNA干扰验证特定蛋白在转运中的作用
• 代谢抑制法：使用代谢抑制剂评估转运稳定性
• 高通量筛选法：自动化平台进行大规模转运测试
• 计算模拟法：基于计算机模型预测旁路转运行为

检测仪器

• Transwell小室系统
• 跨上皮电阻测量仪
• 荧光显微镜
• 液相色谱-质谱联用仪
• 酶标仪
• 细胞培养箱
• 倒置显微镜
• 实时细胞分析仪
• 微透析系统
• 流式细胞仪
• Western blot系统
• pH计
• 温度控制水浴
• 高速离心机
• 细胞计数仪

细胞旁路转运评估测试中，常见问题包括：如何选择合适的细胞模型进行旁路转运评估？通常根据目标组织（如肠道或血脑屏障）选择Caco-2或MDCK等细胞模型，并结合跨上皮电阻测量验证单层完整性。细胞旁路转运测试在药物开发中有何应用？它主要用于预测药物的口服生物利用度和毒性，帮助优化制剂设计。影响细胞旁路转运结果的关键因素有哪些？包括细胞单层质量、转运时间、化合物浓度以及环境条件如pH和温度等。