酶切完整性测试

信息概要

• 酶切完整性测试是评估核酸样本质量的核心检测项目，主要验证DNA/RNA样本在酶切反应中的完整性和可操作性
• 本检测对分子生物学研究、基因工程和临床诊断具有重要意义，可确保实验数据的准确性和可重复性
• 通过检测可识别样本降解、污染及抑制剂存在等问题，降低实验失败风险
• 第三方检测机构提供符合ISO 17025标准的认证服务，覆盖各类生物样本的酶切特性分析

检测项目

• DNA片段大小分布
• RNA完整性数值
• 限制性内切酶效率
• 核酸降解程度
• 样本纯度比值
• 酶切位点识别率
• 缓冲体系兼容性
• 抑制剂残留检测
• 甲基化敏感度
• 星号活性评估
• 末端连接效率
• 酶切反应动力学
• 产物得率测定
• 非特异性切割率
• 温度敏感性
• pH耐受范围
• 离子强度依赖性
• 时间进程分析
• 底物特异性验证
• 酶稳定性测试
• 批次间一致性
• 载体切割效率
• 基因组DNA适用性
• PCR产物酶切效果
• 酶单位活性标定
• 交叉污染检测
• 储存稳定性监测
• 荧光标记效率
• 连接克隆成功率
• 限制性片段多态性

检测范围

• 质粒DNA
• 基因组DNA
• 病毒RNA
• cDNA文库
• PCR扩增产物
• siRNA片段
• miRNA样本
• 线粒体DNA
• 叶绿体DNA
• 人工合成寡核苷酸
• BAC克隆
• YAC载体
• 黏粒载体
• 噬菌体DNA
• 宏基因组样本
• FFPE样本DNA
• 单细胞全基因组
• 甲基化DNA
• 荧光标记探针
• DNA分子量标准品
• RNA-Seq文库
• ChIP-DNA片段
• RACE产物
• 限制性酶切产物
• DNA测序文库
• 基因编辑产物
• 质粒亚克隆
• 核酸疫苗
• 基因治疗载体
• 古DNA样本

检测方法

• 凝胶电泳分析：通过核酸迁移率评估片段大小分布
• 毛细管电泳：高精度定量核酸片段长度
• 荧光定量PCR：检测酶切效率及抑制剂影响
• 紫外分光光度法：测定核酸纯度及浓度
• 微流体芯片技术：快速自动化核酸完整性检测
• Southern印迹：特异性验证目标片段完整性
• 生物分析仪检测：提供数字化完整性评分
• 质谱分析法：准确测定酶切产物分子量
• 高通量测序：全面评估酶切位点识别率
• 限制性图谱分析：验证酶切位点分布模式
• 连接克隆效率测试：评估酶切末端适用性
• 甲基化敏感性检测：分析表观遗传修饰影响
• 酶动力学研究：测定反应速率及条件优化
• 热稳定性测试：评估酶活性温度耐受范围
• 离子依赖性实验：确定最佳反应缓冲条件
• 时间梯度分析：监控酶切反应进程
• 交叉污染检测：确保样本处理过程无污染
• 标准品比对法：验证检测系统准确性
• 数字PCR定量：绝对定量酶切产物浓度
• 纳米孔测序技术：实时监测酶切反应过程

检测仪器

• 生物分析仪
• 实时荧光定量PCR仪
• 毛细管电泳系统
• 凝胶成像系统
• 紫外分光光度计
• 纳米孔测序仪
• 质谱分析仪
• 微量分光光度计
• 恒温金属浴
• 梯度PCR仪
• 高速冷冻离心机
• 电泳仪电源
• 核酸提取项目合作单位
• 微孔板读数仪
• 超微量核酸检测仪