病毒包装细胞系测试

信息概要

• 病毒包装细胞系测试是评估用于病毒载体生产的工程化细胞的关键质量控制环节，通过检测细胞系的遗传稳定性、病毒生产能力及安全性指标，确保基因治疗和疫苗研发中病毒载体的合规性与一致性。该检测对保障生物制品批间稳定性、防止重组病毒污染及满足监管要求具有核心意义。

检测项目

• 细胞形态学观察
• 细胞增殖速率测定
• 染色体核型分析
• 支原体污染检测
• 内毒素水平检测
• 病毒载体滴度测定
• 空壳病毒颗粒比例
• 重组率评估
• 细胞凋亡率检测
• 逆转录酶活性检测
• 载体拷贝数定量
• 目的基因表达效率
• 细胞表面标志物鉴定
• 无菌试验
• 细胞库稳定性测试
• 病毒颗粒完整性分析
• 质粒残留量检测
• 宿主细胞蛋白残留
• DNA残留量测定
• RNA完整性检测
• 细胞代谢产物分析
• 病毒纯化效率评估
• 复制型病毒检测
• 细胞致瘤性试验
• 细胞周期分析
• 细胞活力测定
• 细胞身份鉴定
• 载体序列正确性验证
• 启动子活性检测
• 细胞冻存复苏存活率

检测范围

• HEK293细胞系
• HEK293T细胞系
• HT1080细胞系
• Per.C6细胞系
• CHO细胞系
• BHK-21细胞系
• Vero细胞系
• CAP-T细胞系
• SF9细胞系
• High Five细胞系
• 293SF细胞系
• 293F细胞系
• 293SG细胞系
• 293A细胞系
• 293H细胞系
• 293E细胞系
• 293FT细胞系
• GP2-293细胞系
• Phoenix细胞系
• AmphoPack-293细胞系
• RetroPack细胞系
• EcoPack细胞系
• FlyPack细胞系
• Gag-Pol稳定细胞系
• VSV-G表达细胞系
• Lenti-X细胞系
• Gibco Expi293F细胞系
• FreeStyle 293-F细胞系
• ExpiCHO-S细胞系
• SF+细胞系

检测方法

• qPCR定量分析：检测病毒载体基因组拷贝数
• 流式细胞术：分析细胞表面标志物表达
• TCID50测定：病毒滴度终点稀释法检测
• ELISA检测：定量分析宿主细胞蛋白残留
• 琼脂糖凝胶电泳：验证DNA/RNA完整性
• 免疫印迹(Western Blot)：检测特定蛋白表达
• 细胞计数仪分析：监测细胞生长动力学
• 透射电镜观察：病毒颗粒形态学检查
• 高通量测序：载体序列完整性验证
• 限制性酶切分析：质粒构建正确性确认
• 细胞克隆形成试验：评估单克隆源性
• MTT比色法：细胞活力定量检测
• 气相色谱法：残留溶剂分析
• 荧光显微镜观察：报告基因表达检测
• 毛细管电泳：DNA片段大小分布分析
• 质谱分析：蛋白质组分鉴定
• 微核试验：遗传毒性评估
• 细胞迁移实验：致瘤潜力初筛
• 斑块形成试验：功能性病毒滴度测定
• 动态光散射：病毒颗粒粒径分布检测

检测仪器

• 流式细胞仪
• 实时荧光定量PCR仪
• 酶标仪
• 生物反应器
• 细胞计数器
• 超速离心机
• 液相色谱仪
• 气相色谱质谱联用仪
• 冷冻电子显微镜
• 原子力显微镜
• 毛细管电泳系统
• 蛋白质纯化系统
• 激光共聚焦显微镜
• 生物安全柜
• CO2培养箱