重组蛋白表达细胞检测

信息概要

• 重组蛋白表达细胞检测是针对利用基因工程技术在宿主细胞中表达重组蛋白的过程进行的全面分析，涵盖表达水平、纯度和生物活性等关键参数。
• 检测的重要性在于确保重组蛋白的质量、安全性和有效性，对于生物制药、药物开发和科学研究中的质量控制至关重要，可避免蛋白错误折叠、污染或活性丧失等问题。
• 本服务概括了从细胞培养到蛋白纯化的多环节检测，提供标准化流程以确保结果准确可靠，支持产品合规性和商业化应用。

检测项目

• 蛋白浓度测定
• 蛋白纯度分析
• SDS-PAGE电泳
• 西方 blotting检测
• ELISA定量
• 生物活性测定
• 内毒素水平检测
• 宿主细胞DNA残留
• 宿主细胞蛋白残留
• 等电点分析
• 分子量测定
• 糖基化修饰检测
• 磷酸化修饰分析
• 二硫键结构验证
• 蛋白聚集状态评估
• 溶解度测试
• 热稳定性分析
• 酶活性测定
• 受体结合亲和力
• 免疫原性评估
• 细胞毒性测试
• 信号转导活性
• 细胞增殖影响
• 凋亡诱导检测
• 细胞周期分析
• 迁移能力测定
• 侵袭性评估
• 血管生成活性
• 氧化稳定性测试
• 剪切敏感性分析
• 降解产物检测
• 抗原性验证
• 脂质修饰分析
• 亚细胞定位
• 共表达蛋白检测

检测范围

• 哺乳动物细胞系（如HEK293）
• CHO细胞
• 昆虫细胞（如Sf9）
• 酵母细胞
• 大肠杆菌表达系统
• 植物细胞表达系统
• 人类细胞系
• 小鼠细胞系
• 悬浮培养细胞
• 贴壁培养细胞
• 稳定转染细胞株
• 瞬时转染细胞
• 高表达克隆细胞
• 低表达细胞种群
• 原代细胞
• 干细胞衍生细胞
• 癌细胞系
• 免疫细胞（如T细胞）
• 神经元细胞
• 上皮细胞
• 成纤维细胞
• 肝细胞
• 肾细胞
• 肺细胞
• 心脏细胞
• 脑细胞
• 血细胞
• 生殖细胞
• 微生物表达系统
• 转基因动物细胞
• 杂交瘤细胞
• 永生化细胞系
• 原代培养物
• 三维培养细胞
• 共培养系统

检测方法

• SDS-PAGE：通过电泳分离蛋白，分析分子量和纯度。
• 西方 blotting：利用抗体检测特定蛋白的表达和修饰。
• ELISA：基于免疫反应定量蛋白浓度。
• 质谱分析：鉴定蛋白序列、分子量和翻译后修饰。
• 圆二色谱：分析蛋白二级结构和构象变化。
• 动态光散射：测定蛋白溶液的粒径和聚集状态。
• 等电聚焦：确定蛋白的等电点以评估电荷异质性。
• 液相色谱：用于蛋白分离、纯度和定量分析。
• 尺寸排阻色谱：评估蛋白聚集度和分子大小分布。
• 离子交换色谱：基于电荷差异分离蛋白。
• 亲和色谱：利用特异性结合纯化目标蛋白。
• 流式细胞术：检测细胞表面蛋白表达和细胞活性。
• 免疫荧光：可视化蛋白在细胞内的定位和表达。
• PCR：扩增DNA以检测基因整合和表达水平。
• RT-qPCR：定量mRNA表达，评估转录活性。
• 细胞计数和活力测定：如台盼蓝染色，评估细胞健康。
• MTT assay：通过代谢活性检测细胞增殖和毒性。
• 凋亡检测：如Annexin V/PI染色，分析程序性细胞死亡。
• 受体结合实验：测定蛋白与受体的亲和力和特异性。
• 酶动力学分析：评估酶活性和底物转化速率。
• 热位移分析：监测蛋白热稳定性以预测保存条件。
• 荧光共振能量转移：研究蛋白相互作用和构象变化。
• 表面等离子共振：实时分析生物分子结合动力学。
• 核磁共振：解析蛋白三维结构和动态行为。
• X射线晶体学：确定蛋白原子级结构。

检测仪器

• 分光光度计
• 酶标仪
• 流式细胞仪
• 质谱仪
• 液相色谱仪
• 凝胶成像系统
• 蛋白质印迹系统
• 离心机
• 生物反应器
• 细胞培养箱
• 显微镜
• PCR仪
• 实时荧光定量PCR仪
• 电穿孔仪
• 蛋白纯化系统
• 动态光散射仪
• 圆二色谱仪
• 等电聚焦系统
• 表面等离子共振仪
• 核磁共振谱仪