抑郁焦虑共病小鼠慢性皮质酮损伤模型

一、疾病概述

焦虑症和抑郁症虽是相互独立的疾病单元，但在临床上共病发生率很高。约有一半的抑郁症患者伴发焦虑症。二者共病有三条路径：儿童或青年期抑郁症继发焦虑症，儿童或青年期焦虑症继发抑郁症，或者焦虑症和抑郁症同时发病。焦虑症可以表现为广泛性焦虑症、社交恐惧症等不同形式。

二、模型背景

1、造模因素信息

化学因素

2、实验动物背景信息

C57BL/6J

3、研究背景

抑郁症和焦虑症共病，在治疗上，比单独的抑郁症和焦虑症更加困难，用药剂量更大，病程更长，出现自杀和复发的可能性更大。

表型比较稳定的焦虑抑郁共病模型较少。应激因素被认为是焦虑症、抑郁症等精神疾患的重要风险因子，以物理应激为代表的慢性社会失败应激模型的抑郁焦虑共病表型稳定，应用较为广泛[1]。外源性的应激会引起下丘脑-垂体-肾上腺轴（hypothalamus-pitutary-adrenal，HPA）负反馈失调，促使体内糖皮质激素释放，通过一系列神经生化机制，导致海马、前额皮层等受损。啮齿类动物的糖皮质激素称为皮质酮 （corticosterone，CORT）。皮质酮通过皮下注射、饮入等方式，增加动物体内的皮质酮水平[2]，可以模拟抑郁症患者的神经生物学变化。目前对于该模型的研究，以抑郁症为主，抑郁焦虑共病的研究较少[3]。

[1] Wolk CB, Carper MM, Kendall PC, Olino TM, Marcus SC, Beidas RS. Pathways to anxiety-depression comorbidity: A longitudinal examination of childhood anxiety disorders. Depress Anxiety. 2016;33:978-86.

[2] Galyamina AG, Kovalenko IL, Smagin DA, Kudryavtseva NN. [Relationship of Anxiety and Depression in the Development of Mixed Anxiety/Depression Disorder. An Experimental Study of Comorbidity Mechanisms (Review)]. Zh Vyssh Nerv Deiat Im I P Pavlova. 2016;66:181-201.

[3] Novello S, Arcuri L, Dovero S, Dutheil N, Shimshek DR, Bezard E, et al. G2019S LRRK2 mutation facilitates alpha-synuclein neuropathology in aged mice. Neurobiol Dis. 2018;120:21-33.

1.实验动物：C57BL/6J

2. 实验试剂：皮质酮，羟丙基-β-环糊精

3. 实验操作规程：将皮质酮溶于0.45%羟丙基-β-环糊精溶液中，35ug/ml/d（相当于5 mg/kg/d），避光，动物在造模和行为学检测期间连续饮用。正常组动物给予0.45%羟丙基-β-环糊精溶液。造模35 d后，进行行为学实验。行为学实验结束后，每组取3只动物，灌注固定，进行免疫组化检测。

1.皮质酮模型对糖水偏爱实验的影响。如图1所示，皮质酮模型组糖水偏爱指数与正常组比较，无显著性差异（P>0.05）。

图1皮质酮模型对糖水偏爱指数的影响

2. 皮质酮模型对强迫游泳实验的影响。如图2所示，皮质酮模型组强迫游泳不动时间显著延长，与正常组比较，具有显著性差异（P<0.05）。

图2 皮质酮模型对强迫游泳不动时间的影响（mean ± SEM， *P<0.05，与正常组比较）

3. 皮质酮模型对空场实验的影响。如图3A、3B所示，皮质酮模型组和正常组总路程无显著性差异（P>0.05）。如图3C、3D、3E和3F所示，皮质酮模型组中央区时间、路程及进入频次显著减少，边缘区时间显著延长，和正常组相比，具有显著性差异（P<0.05，P<0.01，P<0.01，P<0.01）。

图3 慢性束缚模型对空场实验的影响（mean ± SEM，**P<0.01，与正常组比较；）

4.皮质酮模型对新奇抑制摄食实验的影响

如图4A所示，皮质酮模型组摄食潜伏期显著延长，与正常组比较，具有显著性差异（P<0.05）。如图4B所示，皮质酮模型组和正常组5 min 内摄食量无显著性差异（P>0.05）。

图4 慢性束缚模型对新奇抑制摄食实验的影响（mean±SEM，**P<0.01，与正常组比较）

5. 皮质酮模型对海马不同分区突触素表达的影响 如图5所示，突触素阳性表达产物呈棕色颗粒，正常组动物海马CA1区、DG区和CA3区棕色颗粒粗大密集、沉积成带。皮质酮组棕色颗粒稀疏，突触素表达显著降低。

图5 皮质酮对海马不同分区突触素的影响

注：A、B：CA1区，C、D：DG区，E、F：CA3区；正常组：A、C、E，皮质酮组：B、D、F

本模型制备过程遵守啮齿类行为学设施动物饲养、行为学实验方法等标准操作规程，对环境和生态无影响。

1. 鉴定与评价技术方法和指标体系：

1.1 动物行为学方法

1.2 HPA轴激素的检测

2. 应用：该模型与抑郁焦虑共病的常用模型社会失败模型相比较，造模方法更简便，占用饲养空间小，行为学表型稳定，可以与物理应激模型互为补充。