条件性Slc2a9-Floxp敲除小鼠模型

Slc2a9基因编码的蛋白SLC2A9是促进葡萄糖转运蛋白家族的一个成员，在维持葡萄糖稳态中起着重要作用。编码蛋白SLC2A9可能在软骨基质中软骨细胞的发育和存活中发挥作用。研究表明，SLC2A9也是一种高容量的尿酸盐转运体，其缺失以一种组织特异性的方式改变尿酸稳态。此外，它在其他极化的上皮细胞类型中是基外侧和顶端膜的转运蛋白。在人类中，携带SLC2A9功能缺失突变的人有家族性2型肾低尿酸血症，这是一种以低尿酸血症、与肾结石相关的肾衰竭和剧烈运动中急性肾功能衰竭增加的倾向为特征的疾病。全身携带SLC2A9缺失的小鼠会发生高尿酸血症，并由于管内尿酸沉淀而表现出严重的肾病。SLC2A9对肿瘤抑制有潜在的作用:SLC2A9在人肝癌组织和细胞系中的表达降低。此外，过表达SLC2A9可以抑制肝癌细胞的增殖。SCL2A9通过抑制caspase 3的表达诱导肝癌细胞凋亡。SLC2A9可能是一种新的肿瘤抑制基因，也是肝癌治疗的潜在靶点。

F0代构建：采用Cas9进行基因定点敲入。

Slc2a9基因编码的蛋白SLC2A9是促进葡萄糖转运蛋白家族的一个成员，在维持葡萄糖稳态中起着重要作用。在人类中，携带SLC2A9功能缺失突变的人有家族性2型肾低尿酸血症，这是一种以低尿酸血症、与肾结石相关的肾衰竭和剧烈运动中急性肾功能衰竭增加的倾向为特征的疾病。全身携带SLC2A9缺失的小鼠会发生高尿酸血症，并由于管内尿酸沉淀而表现出严重的肾病。此外，SLC2A9可能是一种新的肿瘤抑制基因，也是肝癌治疗的潜在靶点。

模型动物饲养在武汉大学人民医院动物房SPF级动物实验室，实验动物使用许可证SYXK（鄂）2015-0027。

（1）建筑特点

门采用专用净化密闭门并配备观察窗。单向走道呈顺时针走向设计。屏障系统内共有大鼠饲养室1间，小鼠饲养室3间，隔离观察室1间，实验准备室1间，洁物存放室1间，清洗消毒室1间。此外，屏障系统外配有监控室、机房和配电室等。

（2）设计参数

室内温度：20～26°C；日温差：≤4°C；相对湿度：40%～70%；换气次数：15～20次/h；气流速度：≤0．2m/s；压强梯度：20～50Pa；空气洁净度：7级；菌落数：≤3个/皿；氨浓度：≤14mg/m3；噪声：≤60dB；Z低工作照度：≥200lx；动物照度：15～20lx；昼夜明暗交替时间：12/12h。

（3）通风和空调系统

动物实验室采用全新风中央空调通风系统。空气经过初、中、三级过滤器后进入实验室内环境。

（4）照明系统

一更、淋浴、二更、气闸、清洁走道、洁物存放处、污物走道、缓冲间和清洗消毒间、动物饲养室、实验准备间、隔离观察室和功能实验室等安装有手动和自动开关，根据实际需要，调节控制室内照明灯。未启用房间、清洁走道、洁物存放处、污物走道等在每日中午12点和晚上8点开启紫外线灯照射1h。

（5）通讯系统

因为SPF级动物实验室的环境和设施具有特殊要求，人员进入后不能随意出入，而室内外的联系又十分重要，故室内各房间均安装内部电话机，按照房间顺序编排电话号码，各室内电话可相互连通，并均与监控室总机保持联系，保证实验室内外信息的及时沟通。

（6）监控系统

对SPF级动物实验室的出入口、走道、实验动物饲养室、功能操作室等重要位置均安装了可作270°旋转的摄像机，能够及时了解设施的运行状态；也能有效督促实验人员执行科学的操作规程，避免人为因素造成室内环境和设施的污染；并对整个实验期间的动物状态和反应进行观察，减少对动物的滋扰。

（7）供水系统

SPF级实验动物饮用水以纯净水为宜。本实验室采用管道供水，将处理后的纯净水用塑胶管道输送到屏障系统内实验准备室，设置接水槽，为实验动物供应灭菌的饮用水和屏障系统内用水。要经常更换和清洗输水管道，清洗笼具的用水添加适当比例的84消毒液。

（8）供电系统、警报系统和消防设施

SPF级动物实验室要求全天候不间断供风和供电，如果出现故障，不能及时发现和处理，就可能导致环境设施的污染、动物感染或死亡，造成严重后果。因此应对SPF级动物实验室使用独立稳定的供电系统，并配备有应急电源。在中央空调机房控制室安装风机故障警报系统，以便及时检修和维护，保证设施的安全运行。

（9）消毒灭菌设备

为防止外界物品进入SPF级动物实验室时所携带的细菌污染室内环境和造成动物交叉感染，按照不同物品的特性，进行紫外线照射消毒、渡槽消毒液消毒或专用的机动门真空灭菌器消毒。

（10）动物饲养笼具

饲养大、小鼠的笼具聚碳酸脂材料的塑胶笼具，具有高透明、耐高压、耐高温、耐酸碱等特点。通用的不锈钢笼具长、宽、高分别为40、30、20cm，适用于单笼饲养有特殊要求的实验动物，配有底盘和食槽，确保实验动物有充足的采食和活动空间，同时也保证室内环境的清洁。

（11）垫料的选择和使用

在使用塑胶垫料时，垫料是大小鼠直接接触的铺垫物，起到吸湿、保暖和造窝的作用。垫料的好坏直接影响到大小鼠术后的恢复、生长发育和繁殖性能。目前，所使用的垫料主要有玉米秸垫料、刨花垫料。

（12）饲料配制

大小鼠的生产型饲料和维持型饲料必须严格按照国家标准，进行科学配制生产。每半年检测一次饲料的微生物指标和有效营养成分指标，保证饲料的质量。

该模型通过长期观察普通狼疮小鼠模型，待其到40周龄时，检测其dsDNA等，结合皮肤症状变化，来确定慢性狼疮皮肤病模型的建立。目前国际上尚欠缺类似模型，为研究狼疮皮肤病发病机制提供了工具。